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SV-80
Tessuto
La pelle
Malattia
Fibroblasti cutanei normali (immortalizzati con SV40; non tumorigenici)
Sito metastatico
Non applicabile (linea cellulare di fibroblasti normali; non si tratta di un campione tumorale)
Sinonimi
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Documenti

SV-80

Cell line · Codice prodotto 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
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01Informazioni generali

Descrizione
Questa linea trasformata da SV40 è stata originariamente generata utilizzando cellule derivate da una biopsia cutanea di una donna adulta (ceppo A) da Todaro et al. nel 1963, non da tessuto polmonare di un feto maschio di cinque mesi (ceppo C). Dopo l'infezione, la morfologia delle colonie in crescita è cambiata, producendo colonie di tipo fibroblastico ed epitelioide. La designazione di SV-80 di origine polmonare, poi mantenuta, molto probabilmente non era valida. Tuttavia, questa linea cellulare sarà ulteriormente caratterizzata in termini di antigene p53 e presenza dell'antigene T grande.
Tessuto
La pelle
Malattia
Fibroblasti cutanei normali (immortalizzati con SV40; non tumorigenici)
Sito metastatico
Non applicabile (linea cellulare di fibroblasti normali; non si tratta di un campione tumorale)
Applicazioni
Ricerca sulla riparazione del DNA; biologia dei fibroblasti immortalizzati con SV40; citogenetica; test di genotossicità; fibroblasti umani normali come riferimento per studi comparativi sul cancro; biologia dell’antigene T grande dell’SV40
Sinonimi
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Fibroblasti
Tumorigenico
SMRV: negativo, come confermato dalla PCR in tempo reale
Cariotipo
Numero modale = 76, intervallo = 52-87
Tempo di raddoppio
da 20 a 24 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SV-80 (numero di catalogo Cytion 300345)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0541

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rapporto di frazionamento
Da 1 a 5
Densità di semina
da 3 a 5 × 10³ cellule/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 1 a 2 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Veloce
Scongelamento e coltura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
Adulti
Etnia
Caucasico