Gå til innholdet
SV-80
Vev
Hud
Sykdom
Fibroblaster fra normal hud (SV40-immortaliserte; ikke-tumorogene)
Metastaseområde
Ikke relevant (vanlig fibroblastlinje; ikke en tumorprøve)
Synonymer
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Dokumenter

SV-80

Cell line · Produktnummer 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse
Denne SV40-transformerte linjen ble opprinnelig generert ved hjelp av celler som ble avledet fra en hudbiopsi fra en voksen kvinne (stamme A) av Todaro et al. i 1963, ikke fra lungevev fra et fem måneder gammelt mannlig foster (stamme C). Etter infeksjon endret morfologien til de voksende koloniene seg ved at det ble produsert fibroblastiske og epiteloide kolonityper. Betegnelsen av SV-80 som lungeopprinnelse, og som deretter ble beholdt, var sannsynligvis ugyldig. Denne cellelinjen vil imidlertid bli karakterisert videre med hensyn til p53-antigen og tilstedeværelse av stort T-antigen.
Vev
Hud
Sykdom
Fibroblaster fra normal hud (SV40-immortaliserte; ikke-tumorogene)
Metastaseområde
Ikke relevant (vanlig fibroblastlinje; ikke en tumorprøve)
Søknader
Forskning på DNA-reparasjon; biologi ved SV40-immortaliserte fibroblaster; cytogenetikk; genotoksisitetsprøving; referanse av normale humane fibroblaster for sammenligningsstudier av kreft; biologi ved SV40-stort T-antigen
Synonymer
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Fibroblast
Tumorinduserende
SMRV: Negativ, bekreftet med sanntids-PCR
Karyotype
Modaltall = 76, intervall = 52 til 87
Fordoblingstid
20 til 24 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SV-80 (Cytion katalognummer 300345)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0541

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Oppdelingsforhold
1 til 5
Såtetthet
3 til 5 × 10³ celler/cm²
Væskefornyelse
1 til 2 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Rask
Tining og dyrking

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
Voksen
Etnisitet
Kaukasisk