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SV-80
ティッシュ
皮膚
病気
正常皮膚線維芽細胞(SV40による不死化;非腫瘍性)
転移部位
該当なし(正常な線維芽細胞株;腫瘍検体ではない)
同義語
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

SV-80

Cell line · 製品番号 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

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01概要

説明
このSV40形質転換株はもともと、生後5ヵ月の男性胎児の肺組織(C株)ではなく、1963年にTodaroらによって成人女性の皮膚生検(A株)由来の細胞を用いて作製された。感染後、増殖したコロニーの形態は変化し、線維芽細胞型と上皮細胞型のコロニーが形成された。SV-80が肺由来であるという指定は、おそらく無効であろう。しかしながら、この細胞株はp53抗原とラージT抗原の存在という点で、さらに特徴づけがなされるであろう。
ティッシュ
皮膚
病気
正常皮膚線維芽細胞(SV40による不死化;非腫瘍性)
転移部位
該当なし(正常な線維芽細胞株;腫瘍検体ではない)
用途
DNA修復の研究;SV40不死化線維芽細胞の生物学;細胞遺伝学;遺伝毒性試験;がん比較研究のための正常ヒト線維芽細胞の参照株;SV40大型T抗原の生物学
同義語
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
細胞の種類
線維芽細胞
腫瘍形成性
SMRV: 陰性、Real-Time PCRで確認。
核型
モーダルナンバー=76、範囲=52~87
倍増時間
20~24時間

04識別子

引用
SV-80 (Cytion カタログ番号 300345)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0541

05取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
分割比率
1~5
播種密度
3~5 × 10³ 細胞/cm²
流体の更新
週1~2回
解凍後の回復
速い
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
アダルト
民族
白人