İçeriğe atla
SV-80
Doku
Cilt
Hastalık
Normal cilt fibroblasti (SV40 ile ölümsüzleştirilmiş; tümör oluşturmayan)
Metastaz yeri
Uygulanamaz (normal fibroblast hattı; tümör örneği değildir)
Eş anlamlılar
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Belgeler

SV-80

Cell line · Ürün numarası 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama
Bu SV40-transformasyonlu hat ilk olarak 1963 yılında Todaro ve arkadaşları tarafından yetişkin bir kadının deri biyopsisinden (suş A) elde edilen hücreler kullanılarak üretilmiştir, beş aylık bir erkek fetüsün akciğer dokusundan (suş C) elde edilmemiştir. Enfeksiyondan sonra, büyüyen kolonilerin morfolojisi fibroblastik ve epiteloid koloni tiplerinin üretilmesiyle değişmiştir. SV-80'in akciğer kökenli olarak tanımlanması ve daha sonra muhafaza edilmesi büyük olasılıkla geçersizdi. Bununla birlikte, bu hücre hattı p53 antijeni ve büyük T antijeninin varlığı açısından daha fazla karakterize edilecektir.
Doku
Cilt
Hastalık
Normal cilt fibroblasti (SV40 ile ölümsüzleştirilmiş; tümör oluşturmayan)
Metastaz yeri
Uygulanamaz (normal fibroblast hattı; tümör örneği değildir)
Uygulamalar
DNA onarımı araştırmaları; SV40 ile ölümsüzleştirilmiş fibroblast biyolojisi; sitogenetik; genotoksisite testleri; kanser karşılaştırma çalışmaları için normal insan fibroblast referansı; SV40 büyük T antijeni biyolojisi
Eş anlamlılar
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Fibroblast
Tümör oluşturucu
SMRV: Gerçek Zamanlı PCR ile doğrulandığı üzere negatif
Karyotip
Modal sayı = 76, aralık = 52 ila 87
İki katına çıkma süresi
20 ila 24 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
SV-80 (Cytion katalog numarası 300345)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0541

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 5'e kadar
Ekim yoğunluğu
3 ila 5 × 10³ hücre/cm²
Sıvı değişimi
haftada 1 ila 2 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Hızlı
Çözme ve kültürleme

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
Yetişkin
Etnik köken
Kafkas