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SV-80
Gewebe
Haut
Krankheit
Normale Hautfibroblasten (SV40-immortalisiert; nicht tumorogen)
Metastasenherd
Nicht zutreffend (normale Fibroblastenlinie; keine Tumorprobe)
Synonyme
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

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SV-80

Cell line · Artikelnummer 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung
Diese SV40-transformierte Linie wurde ursprünglich mit Zellen erzeugt, die Todaro et al. 1963 aus der Hautbiopsie einer erwachsenen Frau (Stamm A) und nicht aus dem Lungengewebe eines fünf Monate alten männlichen Fötus (Stamm C) gewonnen hatten. Nach der Infektion veränderte sich die Morphologie der wachsenden Kolonien dahingehend, dass fibroblastische und epitheloide Kolonietypen gebildet wurden. Die Bezeichnung SV-80 als aus der Lunge stammend, die dann beibehalten wurde, war höchstwahrscheinlich ungültig. Diese Zelllinie wird jedoch im Hinblick auf das p53-Antigen und das Vorhandensein des großen T-Antigens weiter charakterisiert.
Gewebe
Haut
Krankheit
Normale Hautfibroblasten (SV40-immortalisiert; nicht tumorogen)
Metastasenherd
Nicht zutreffend (normale Fibroblastenlinie; keine Tumorprobe)
Anwendungen
Forschung zur DNA-Reparatur; Biologie von SV40-immortalisierten Fibroblasten; Zytogenetik; Genotoxizitätsprüfungen; Referenzmaterial aus normalen menschlichen Fibroblasten für Vergleichsstudien zu Krebserkrankungen; Biologie des großen T-Antigens von SV40
Synonyme
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Fibroblasten
Tumorauslösend
SMRV: Negativ, wie durch Real-Time PCR bestätigt
Karyotyp
Modalzahl = 76, Spanne = 52 bis 87
Verdopplungszeit
20 bis 24 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
SV-80 (Cytion Katalognummer 300345)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0541

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Split-Verhältnis
1 bis 5
Aussaatdichte
3 bis 5 × 10³ Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
1 bis 2 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Schnell
Auftauen und Kultivierung

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
Erwachsener
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch