Pereiti prie turinio
SV-80
Audinys
Odos
Liga
Normalios odos fibroblastai (SV40 imortalizuoti; netumorogeniniai)
Metastazių vieta
Netaikoma (įprasta fibroblastų linija; tai nėra naviko mėginys)
Sinonimai
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Dokumentai

SV-80

Cell line · Prekės numeris 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas
Ši SV40 transformuota linija iš pradžių buvo sukurta naudojant ląsteles, kurios 1963 m. Todaro ir kt. buvo gautos iš suaugusios moters odos biopsijos (A padermė), o ne iš penkių mėnesių vyriškos lyties vaisiaus plaučių audinio (C padermė). Po užsikrėtimo augančių kolonijų morfologija pasikeitė - atsirado fibroblastinės ir epitelioidinės kolonijos. Tikėtina, kad pavadinimas SV-80 yra plaučių kilmės ir vėliau buvo paliktas galioti. Tačiau ši ląstelių linija bus toliau charakterizuojama pagal p53 antigeną ir didelio T antigeno buvimą.
Audinys
Odos
Liga
Normalios odos fibroblastai (SV40 imortalizuoti; netumorogeniniai)
Metastazių vieta
Netaikoma (įprasta fibroblastų linija; tai nėra naviko mėginys)
Paraiškos
DNR remonto tyrimai; SV40 imortalizuotų fibroblastų biologija; citogenetika; genotoksiškumo tyrimai; normalių žmogaus fibroblastų etalonas vėžio lyginamiesiems tyrimams; SV40 didžiojo T antigeno biologija
Sinonimai
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Fibroblastai
Tumorogeninis
SMRV: neigiamas, patvirtinta realaus laiko PGR
Kariotipas
Modalinis skaičius = 76, intervalas = 52-87
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
20-24 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
SV-80 (Cytion katalogo numeris 300345)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0541

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skaidymo santykis
1–5
Sėjos tankis
3–5 × 10³ ląstelių/cm²
Skysčių atnaujinimas
1-2 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Greitai
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
Suaugusiųjų
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių