Перейти до вмісту
SV-80
Тканина
Шкіра
Хвороба
Фібробласти нормальної шкіри (іморталізовані вірусом SV40; непухлинні)
Місце метастазування
Не стосується (нормальна лінія фібробластів; зразок не є пухлинним)
Синоніми
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Документи

SV-80

Cell line · Номер товару 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис
Ця SV40-трансформована лінія спочатку була отримана з використанням клітин, які були отримані з біопсії шкіри дорослої жінки (штам А) Тодаро та ін. у 1963 році, а не з легеневої тканини п'ятимісячного плоду чоловічої статі (штам С). Після інфікування морфологія колоній, що зростали, змінювалася: утворювалися фібробластичні та епітеліоїдні типи колоній. Позначення SV-80 як легеневого походження, яке потім збереглося, швидше за все, було помилковим. Однак ця клітинна лінія буде охарактеризована далі за антигеном р53 і наявністю великого Т-антигену.
Тканина
Шкіра
Хвороба
Фібробласти нормальної шкіри (іморталізовані вірусом SV40; непухлинні)
Місце метастазування
Не стосується (нормальна лінія фібробластів; зразок не є пухлинним)
Застосування
Дослідження механізмів репарації ДНК; біологія фібробластів, імунізованих вірусом SV40; цитогенетика; тестування на генотоксичність; нормальні людські фібробласти як еталон для порівняльних досліджень ракових клітин; біологія великого Т-антигену вірусу SV40
Синоніми
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Тип клітини
Фібробласт
Пухлиноутворювальний
СМРВ: Негативний, що підтверджено ПЛР в режимі реального часу
Каріотип
Модальне число = 76, діапазон = від 52 до 87
Час подвоєння
від 20 до 24 годин

04Ідентифікатори

Посилання
SV-80 (каталожний номер 300345)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0541

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
ДМЕМ, w: 4,5 г/л Глюкоза, w: 4 мМ L-глутамін, w: 3,7 г/л NaHCO3, w: 1,0 мМ піруват натрію (цит. номер 820300a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Коефіцієнт розподілу
від 1 до 5
Щільність висіву
від 3 до 5 × 10³ клітин/см²
Оновлення рідини
1-2 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Швидко
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Вік донора
Дорослий
Етнічна приналежність
Кавказець