Přejít na obsah
SV-80
Tkáň
Kůže
Nemoc
Fibroblasty normální kůže (imortalizované virem SV40; netumorogenní)
Místo metastázy
Nevztahuje se (normální fibroblastová linie; nejedná se o nádorový vzorek)
Synonyma
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Dokumenty

SV-80

Cell line · Číslo výrobku 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis
Tato linie transformovaná SV40 byla původně vytvořena s použitím buněk, které Todaro a kol. v roce 1963 získali z kožní biopsie dospělé ženy (kmen A), nikoli z plicní tkáně pětiměsíčního mužského plodu (kmen C). Po infekci se morfologie rostoucích kolonií změnila v tom smyslu, že vznikly fibroblastické a epiteloidní typy kolonií. Označení SV-80 jako plicního původu, které pak bylo zachováno, bylo s největší pravděpodobností neplatné. Tato buněčná linie však bude dále charakterizována z hlediska antigenu p53 a přítomnosti velkého T antigenu.
Tkáň
Kůže
Nemoc
Fibroblasty normální kůže (imortalizované virem SV40; netumorogenní)
Místo metastázy
Nevztahuje se (normální fibroblastová linie; nejedná se o nádorový vzorek)
Aplikace
Výzkum oprav DNA; biologie fibroblastů imortalizovaných virem SV40; cytogenetika; testování genotoxicity; normální lidské fibroblasty jako referenční vzorek pro srovnávací studie rakoviny; biologie velkého T-antigenu viru SV40
Synonyma
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Fibroblasty
Tumorogenní
SMRV: Negativní, potvrzeno metodou Real-Time PCR
Karyotyp
Modální číslo = 76, rozsah = 52 až 87
Doba zdvojnásobení
20 až 24 hodin

04Identifikátory

Citace
SV-80 (katalogové číslo Cytion 300345)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0541

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 5
Hustota výsevu
3 až 5 × 10³ buněk/cm²
Obnova tekutin
1 až 2krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Rychle
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
Dospělí
Etnická příslušnost
Kavkazský