- Тъкан
- Кожа
- Заболяване
- Фибробласти от нормална кожа (имуortalizirani с SV40; нетуморогенни)
- Място на метастазите
- Неприложимо (нормална линия фибробласти; не е туморна проба)
- Синоними
- SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80
Документи
SV-80
Cell line · Номер на продукта 300345
This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...
Персонализиране / Препоръки
- SV-80Cell line€430.00
01Обща информация
- Описание
- Тази SV40-трансформирана линия първоначално е създадена с помощта на клетки, получени от кожна биопсия на възрастна жена (щам А) от Todaro et al. през 1963 г., а не от белодробна тъкан на петмесечен мъжки плод (щам С). След заразяването морфологията на растящите колонии се променя, като се образуват фибробластни и епителиални типове колонии. Определянето на SV-80 за белодробен произход, което след това е запазено, най-вероятно е било невалидно. Въпреки това тази клетъчна линия ще се характеризира допълнително по отношение на антигена p53 и наличието на голям Т антиген.
- Тъкан
- Кожа
- Заболяване
- Фибробласти от нормална кожа (имуortalizirani с SV40; нетуморогенни)
- Място на метастазите
- Неприложимо (нормална линия фибробласти; не е туморна проба)
- Приложения
- Изследвания в областта на репарацията на ДНК; биология на фибробластите, иммортализирани с SV40; цитогенетика; тестове за генотоксичност; референтни нормални човешки фибробласти за сравнителни проучвания на рака; биология на големия Т-антиген на SV40
- Синоними
- SV-80
- SV 80
- SV-A clone 80
- SV clone 80
- Simian virus 80
02Класификация
- Организъм
- Човек
- Секс
- Женски
- Свойства, свързани с растежа
- Привърженик
- Статус на ГМО
- GMO-S1
- Подробности относно статуса на ГМО
- GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Ниво на биологична безопасност
- 1
03Характеристики
- Морфология
- Подобни на епител
- Тип клетка
- Фибробласти
- Туморогенен
- SMRV: Отрицателен, потвърдено чрез Real-Time PCR
- Кариотип
- Модално число = 76, диапазон = 52-87
- Време за удвояване
- 20 до 24 часа
04Идентификатори
- Източник
- SV-80 (каталожен номер 300345 на Cytion)
- Данъчен идентификационен номер в NCBI
- 9606
- Целозавър
- CVCL_0541
05Обработка и отглеждане
- Хранителна среда
- DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
- Атмосфера за инкубация
37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.
- Добавки
- Допълнете средата с 10% FBS
- Реагент за дисоциация
- Accutase
- Пресаждане
- Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
- Коефициент на разделяне
- от 1 до 5
- Плътност на засяването
- от 3 до 5 × 10³ клетки/см²
- Обновяване на течността
- 1 до 2 пъти седмично
- Възстановяване след размразяване
- Бърз
- Размразяване и култивиране
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Контрол на качеството и криоконсервация
- Стерилност
Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.
За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
- Среда за замразяване
- Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
- Условия за съхранение
За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.
- Условия за доставка
Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
07Дарител
- Възраст на донора
- Възрастни
- Етническа принадлежност
- Кавказки
08Правни въпроси и безопасност
- Мерки за безопасност
- Когато планирате да съхранявате криопрепарат в течен азот за бъдещо размразяване, е задължително да спазвате строги мерки за безопасност. Подходящите защитни ръкавици и облекло са от съществено значение, а по време на прехвърлянето на замразени проби към или от резервоара с течен азот е необходимо да се използва маска за лице или предпазни очила. Това се прави, за да се намали рискът от нараняване от потенциални експлозии на криовиолите при изваждането им, които могат да доведат до изхвърляне на остри фрагменти.
- Гаранция
Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа
За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация
- Необходимо е споразумение за прехвърляне на материали
- Да