Mine otse sisu juurde
SV-80
Kude
Nahk
Haigus
Normaalse naha fibroblast (SV40-ga surematuks muudetud; mittetuumorigeenne)
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (tavaline fibroblastide liin; ei ole kasvajaproov)
Sünonüümid
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Dokumendid

SV-80

Cell line · Toote number 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus
See SV40-transformeeritud liin loodi algselt, kasutades rakke, mis olid saadud täiskasvanud naise nahabiopsiast (tüvi A) Todaro et al. poolt 1963. aastal, mitte viie kuu vanuse meessoost loote kopsukoes (tüvi C). Pärast nakatumist muutus kasvavate kolooniate morfoloogia selliselt, et tekkis fibroblastiline ja epiteloidne kolooniatüüp. Nimetus, et SV-80 on pärit kopsudest ja seejärel säilitati, oli tõenäoliselt kehtetu. Siiski iseloomustatakse seda rakuliini täiendavalt p53 antigeeni ja suure T-antigeeni olemasolu poolest.
Kude
Nahk
Haigus
Normaalse naha fibroblast (SV40-ga surematuks muudetud; mittetuumorigeenne)
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (tavaline fibroblastide liin; ei ole kasvajaproov)
Rakendused
DNA parandamise uurimine; SV40-ga surematuks muudetud fibroblastide bioloogia; tsütogeneetika; genotoksilisuse testimine; normaalse inimese fibroblastide võrdlusmaterjal vähktõve võrdlusuuringuteks; SV40 suure T-antigeeni bioloogia
Sünonüümid
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Fibroblastide
Tuumorigeenne
SMRV: negatiivne, nagu on kinnitanud Real-Time PCR
Karyotüüp
Modaalarv = 76, vahemik = 52 kuni 87
Kahekordistumisaeg
20 kuni 24 tundi

04Tunnused

Viide
SV-80 (Cytioni katalooginumber 300345)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0541

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
3–5 × 10³ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
1 kuni 2 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Kiire
Sulatamine ja kasvatamine

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud
Etniline kuuluvus
Kaukaasia