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SV-80
Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Fibroblastos de piel normal (inmortalizados con SV40; no tumorigénicos)
Lugar de metástasis
No aplicable (línea celular de fibroblastos normales; no es una muestra tumoral)
Sinónimos
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Documentos

SV-80

Cell line · Número de producto 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

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01Información general

Descripción
Esta línea transformada con SV40 fue generada originalmente utilizando células derivadas de una biopsia de piel de una mujer adulta (cepa A) por Todaro et al. en 1963, y no de tejido pulmonar de un feto varón de cinco meses (cepa C). Tras la infección, la morfología de las colonias en crecimiento cambió en el sentido de que se produjeron tipos de colonias fibroblásticas y epiteloides. Lo más probable es que la designación de SV-80 como de origen pulmonar, que luego se mantuvo, no fuera válida. No obstante, esta línea celular se seguirá caracterizando en función del antígeno p53 y de la presencia del antígeno T grande.
Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Fibroblastos de piel normal (inmortalizados con SV40; no tumorigénicos)
Lugar de metástasis
No aplicable (línea celular de fibroblastos normales; no es una muestra tumoral)
Aplicaciones
Investigación sobre la reparación del ADN; biología de los fibroblastos inmortalizados por el SV40; citogenética; ensayos de genotoxicidad; referencia de fibroblastos humanos normales para estudios comparativos sobre el cáncer; biología del antígeno T grande del SV40
Sinónimos
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Fibroblastos
Tumorigénico
SMRV: Negativo, confirmado por PCR en tiempo real
Cariotipo
Número modal = 76, intervalo = 52 a 87
Tiempo de duplicación
de 20 a 24 horas

04Identificadores

Referencia
SV-80 (número de catálogo 300345 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0541

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Relación de división
Del 1 al 5
Densidad de siembra
De 3 a 5 × 10³ células/cm²
Renovación de fluidos
1 ó 2 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Rápido
Descongelación y cultivo

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
Adultos
Origen étnico
Caucásico