Skip to content
SV-80
Tissue
ผิวหนัง
Disease
ไฟโบรบลาสต์ผิวหนังปกติ (SV40-ทำให้เป็นอมตะ; ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก)
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (เป็นเซลล์ไฟโบรบลาสต์ปกติ; ไม่ใช่ตัวอย่างเนื้องอก)
Synonyms
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Documents

SV-80

Cell line · Product number 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description
สายพันธุ์ที่เปลี่ยนแปลงด้วย SV40 นี้ถูกสร้างขึ้นครั้งแรกโดยใช้เซลล์ที่สกัดจากการตัดชิ้นเนื้อผิวหนังของผู้หญิงวัยผู้ใหญ่ (สายพันธุ์ A) โดย Todaro และคณะในปี 1963 ไม่ใช่จากเนื้อเยื่อปอดของทารกเพศชายอายุห้าเดือน (สายพันธุ์ C)หลังจากการติดเชื้อ รูปร่างของโคโลนีที่เติบโตมีการเปลี่ยนแปลง โดยมีการสร้างโคโลนีชนิดไฟโบรบลาสติกและชนิดเอพิธีลอยด์ขึ้น การระบุว่า SV-80 มีต้นกำเนิดจากปอด และยังคงใช้ต่อไปนั้น น่าจะไม่ถูกต้อง อย่างไรก็ตาม สายเซลล์นี้จะได้รับการศึกษาลักษณะเพิ่มเติมในแง่ของแอนติเจน p53 และการมีอยู่ของแอนติเจน T ขนาดใหญ่
Tissue
ผิวหนัง
Disease
ไฟโบรบลาสต์ผิวหนังปกติ (SV40-ทำให้เป็นอมตะ; ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก)
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (เป็นเซลล์ไฟโบรบลาสต์ปกติ; ไม่ใช่ตัวอย่างเนื้องอก)
Applications
การวิจัยการซ่อมแซม DNA; ชีววิทยาของไฟโบรบลาสต์ที่ถูกทำให้เป็นอมตะด้วย SV40; ไซโตจีเนติกส์; การทดสอบความเป็นพิษต่อพันธุกรรม; ไฟโบรบลาสต์ของมนุษย์ปกติสำหรับใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงในการศึกษาเปรียบเทียบกับมะเร็ง; ชีววิทยาของแอนติเจน T ขนาดใหญ่ของ SV40
Synonyms
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
ไฟโบรบลาสต์
Tumourigenic
SMRV: ลบ, ยืนยันโดย Real-Time PCR
Karyotype
หมายเลขโมดัล = 76, ช่วง = 52 ถึง 87
Doubling time
20 ถึง 24 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
SV-80 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300345)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0541

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 5
Seeding density
3 ถึง 5 × 10³ เซลล์/ซม.²
Fluid renewal
1 ถึง 2 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
รวดเร็ว
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
ผู้ใหญ่
Ethnicity
คอเคเชียน