Μετάβαση στο περιεχόμενο
SV-80
Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Ινοβλάστες φυσιολογικού δέρματος (αθανατοποιημένοι με SV40· μη ογκογόνοι)
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (φυσιολογική σειρά ινοβλαστών· δεν πρόκειται για δείγμα όγκου)
Συνώνυμα
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Έγγραφα

SV-80

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Αυτή η μετασχηματισμένη με SV40 γραμμή δημιουργήθηκε αρχικά χρησιμοποιώντας κύτταρα που προήλθαν από βιοψία δέρματος μιας ενήλικης γυναίκας (στέλεχος Α) από τους Todaro et al. το 1963, και όχι από πνευμονικό ιστό ενός αρσενικού εμβρύου πέντε μηνών (στέλεχος Γ). Μετά τη μόλυνση, η μορφολογία των αναπτυσσόμενων αποικιών άλλαξε, καθώς παρήχθησαν ινοβλαστικοί και επιθηλιοειδείς τύποι αποικιών. Ο χαρακτηρισμός του SV-80 ως πνευμονικής προέλευσης και στη συνέχεια διατηρήθηκε, πιθανότατα ήταν άκυρος. Ωστόσο, αυτή η κυτταρική σειρά θα χαρακτηριστεί περαιτέρω όσον αφορά το αντιγόνο p53 και την παρουσία του μεγάλου αντιγόνου Τ.
Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Ινοβλάστες φυσιολογικού δέρματος (αθανατοποιημένοι με SV40· μη ογκογόνοι)
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (φυσιολογική σειρά ινοβλαστών· δεν πρόκειται για δείγμα όγκου)
Εφαρμογές
Έρευνα σχετικά με την επιδιόρθωση του DNA· βιολογία ινοβλαστών που έχουν αθανατοποιηθεί με τον ιό SV40· κυτταρογενετική· δοκιμές γενετοξικότητας· φυσιολογικοί ανθρώπινοι ινοβλάστες ως σημείο αναφοράς για συγκριτικές μελέτες σχετικά με τον καρκίνο· βιολογία του μεγάλου Τ-αντιγόνου του ιού SV40
Συνώνυμα
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Τύπος κυττάρου
Ινοβλάστες
Ογκογόνος
SMRV: Αρνητικό, όπως επιβεβαιώνεται με Real-Time PCR
Καρυότυπος
Μέσος αριθμός = 76, εύρος = 52 έως 87
Χρόνος διπλασιασμού
20 έως 24 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
SV-80 (αριθμός καταλόγου Cytion 300345)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0541

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 5
Πυκνότητα σποράς
3 έως 5 × 10³ κύτταρα/cm²
Ανανέωση υγρών
1 έως 2 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Γρήγορη
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Ενηλίκων
Εθνικότητα
Καυκάσιος