Gå direkte til indholdet
SV-80
Væv
Hud
Sygdom
Fibroblaster fra normal hud (SV40-immortaliserede; ikke-tumorinducerende)
Metastasested
Ikke relevant (normal fibroblastlinje; ikke en tumorprøve)
Synonymer
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Dokumenter

SV-80

Cell line · Varenummer 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse
Denne SV40-transformerede linje blev oprindeligt genereret ved hjælp af celler, der stammede fra en hudbiopsi fra en voksen kvinde (stamme A) af Todaro et al. i 1963, ikke fra lungevæv fra et fem måneder gammelt mandligt foster (stamme C). Efter infektion ændrede morfologien af de voksende kolonier sig, idet der blev produceret fibroblastiske og epiteloide kolonityper. Betegnelsen af SV-80 som værende af lungeoprindelse, og derefter bevaret, var sandsynligvis ugyldig. Denne cellelinje vil dog blive karakteriseret yderligere med hensyn til p53-antigen og tilstedeværelsen af stort T-antigen.
Væv
Hud
Sygdom
Fibroblaster fra normal hud (SV40-immortaliserede; ikke-tumorinducerende)
Metastasested
Ikke relevant (normal fibroblastlinje; ikke en tumorprøve)
Anvendelser
Forskning i DNA-reparation; biologi hos SV40-immortaliserede fibroblaster; cytogenetik; genotoksicitetstest; normale humane fibroblaster som reference i sammenlignende kræftundersøgelser; biologi hos SV40-stort T-antigen
Synonymer
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Fibroblast
Tumorfremkaldende
SMRV: Negativ, som bekræftet af Real-Time PCR
Karyotype
Modaltal = 76, interval = 52 til 87
Fordoblingstid
20 til 24 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SV-80 (Cytion katalognummer 300345)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0541

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 5
Såtæthed
3 til 5 × 10³ celler/cm²
Væskeudskiftning
1 til 2 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Hurtig
Optøning og dyrkning

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
Voksen
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk