
- الأنسجة
- المشيمية، الشبكية
- المرض
- البطانة المشيمية للشبكية الطبيعية (جنينية؛ غير مسببة للأورام)
- موقع الانتشار
- لا ينطبق (سلسلة خلايا بطانة المشيمية الشبكية للجنين الطبيعية)
المستندات
RF/6A
Cell line · رقم المنتج 305150
RF/6A is a rhesus macaque (Macaca mulatta) retinal choroidal endothelial cell line established from fetal choroid and retina tissue. The line is grows as ...
التخصيص / التوصيات
- RF/6ACell line€550.00
01معلومات عامة
- الوصف
RF/6A هو خط خلوي من خلايا بطانة المشيمية والشبكية لقرد المكاك الريسوسي (Macaca mulatta)، تم إنشاؤه من أنسجة المشيمية والشبكية الجنينية. ينمو هذا الخط على شكل طبقة أحادية ملتصقة ذات شكل شبيه بالظهارة. تحتفظ خلايا RF/6A بالخصائص البطانية الرئيسية، بما في ذلك التعبير عن العامل الثامن (عامل فون فيلباند)، والفيبرونكتين، وحبيبات ويبل-بالاد التي يمكن الكشف عنها بالمجهر الإلكتروني — حيث تؤكد هذه الأخيرة هويتها البطانية. تم إنشاء هذا الخط في الأصل لدراسات الأوعية الدموية في الشبكية والمشيمية، وقد تم اعتماده على نطاق واسع كنموذج بطاني للرئيسيات لأبحاث تكوين الأوعية الدموية في العين.
يمكن استخدام RF/6A في أبحاث تكوين الأوعية الدموية في العين، ودراسات الأوعية الدموية في الشبكية والمشيمية، وتقييم العوامل المضادة لتكوين الأوعية الدموية (مثبطات VEGF، بيفاسيزوماب، رانيبيزوماب)، ونمذجة التنكس البقعي المرتبط بالعمر (AMD)، وبيولوجيا اعتلال الشبكية السكري، وتقييم نفاذية الأوعية الدموية في البيئة الميكروية للعين. إن أصل هذه الخلايا من الرئيسيات غير البشرية (NHP) يجعل سلالة RF/6A أقرب إلى بيولوجيا الأوعية الدموية في شبكية العين البشرية مقارنةً بنماذج الخلايا البطانية المستمدة من القوارض، لا سيما في الدراسات التي تتناول استجابات أشكال VEGF الخاصة بالرئيسيات وعلم الأدوية البصري. وتُستخدم هذه السلالة بشكل شائع في اختبارات تكوين الأنابيب، واختبارات الهجرة، وتجارب تحفيز VEGF.
- الأنسجة
- المشيمية، الشبكية
- المرض
- البطانة المشيمية للشبكية الطبيعية (جنينية؛ غير مسببة للأورام)
- موقع الانتشار
- لا ينطبق (سلسلة خلايا بطانة المشيمية الشبكية للجنين الطبيعية)
- التطبيقات
- أبحاث تكوين الأوعية الدموية في العين؛ تكوين الأوعية الدموية في الشبكية والمشيمية؛ تقييم العلاج المضاد لـ VEGF (بيفاسيزوماب، رانيبيزوماب)؛ نمذجة التنكس البقعي المرتبط بالعمر (AMD) واعتلال الشبكية السكري؛ اختبارات تكوين الأنابيب؛ نفاذية الأوعية الدموية؛ نموذج بطانة الأوعية الدموية في شبكية الرئيسيات غير البشرية (NHP)
02التصنيف
- كائن حي
- قرد المكاك الريسوسي
- الجنس
- غير محدد
- خصائص النمو
- الملتزم
- حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- خالية من الكائنات المعدلة وراثيًا
- تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- No genetic modification; wildtype rhesus macaque fetal retinal choroidal endothelial cell line
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- المورفولوجيا
- شبيه بالظهارة
- نوع الخلية
- الخلايا البطانية
- زمن المضاعفة
- حوالي 24 إلى 36 ساعة
04المعرّفات
- المرجع
- RF/6A (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305150)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 9544
- سيلوصور
- CVCL_4552
05التعبير والقابلية للإصابة
- التعبير البروتيني
- العامل Ⅷ، فيبرونيكتين
06التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- نسبة التقسيم
- من 1 إلى 5
- كثافة البذر
- من 1 إلى 2 × 10⁴ خلية/سم²
- تجديد السوائل
- 2 إلى 3 مرات في الأسبوع
- التعافي بعد ذوبان الجليد
- بعد إذابة الثلج، قم بزرع الخلايا بكثافة 5 × 10⁴ خلية/سم² واتركها لمدة 24 ساعة على الأقل حتى تلتصق قبل إجراء أول تغيير للوسط. تجنب وصول المزارع إلى حالة التراصف الكامل، حيث إن تثبيط التلامس قد يقلل من النمط الظاهري للخلايا البطانية.
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
08المانح
- عمر المتبرع
- الجنين
- الأصل العرقي
- لا ينطبق (سلسلة خلايا من الرئيسيات غير البشرية؛ Macaca mulatta)
09الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم