
- Tkanivo
- Cievnatka, sietnica
- Choroba
- Normálny endotélium sietnice a cievnatky (fetálny; netumorogénny)
- Miesto metastáz
- Neplatí (normálna bunková línia endoteliálnych buniek choroidálnej vrstvy sietnice plodu)
Dokumenty
RF/6A
Cell line · Číslo výrobku 305150
RF/6A is a rhesus macaque (Macaca mulatta) retinal choroidal endothelial cell line established from fetal choroid and retina tissue. The line is grows as ...
Prispôsobenie / Odporúčania
- RF/6ACell line€550.00
01Všeobecné informácie
- Popis
RF/6A je bunková línia endoteliálnych buniek sietnice a cievnatky makaka rhesus (Macaca mulatta), získaná z tkaniva cievnatky a sietnice plodu. Táto bunka rastie ako adhezívna monovrstva s morfológiou podobnou epitelu. Bunky RF/6A si zachovávajú kľúčové endoteliálne charakteristiky, vrátane expresie faktora VIII (von Willebrandovho faktora), fibronektínu a Weibel-Paladeho granúl, ktoré sú detekovateľné pomocou elektrónovej mikroskopie – pričom práve posledné menované potvrdzujú ich endoteliálnu identitu. Táto línia bola pôvodne vytvorená na účely štúdia vaskularizácie sietnice a cievnatky a bola široko prijatá ako model endotelu primátov pre výskum očnej angiogenézy.
RF/6A je použiteľná vo výskume očnej angiogenézy, štúdiách vaskularizácie sietnice a cievnatky, hodnotení antiangiogénnych látok (inhibítory VEGF, bevacizumab, ranibizumab), modelovanie vekovej makulárnej degenerácie (AMD), biológiu diabetickej retinopatie a hodnotenie vaskulárnej permeability v mikroprostredí oka. Vďaka pôvodu z neľudských primátov (NHP) je RF/6A bližšia k biológii ciev sietnice človeka než endoteliálne modely hlodavcov, najmä pri štúdiách zahŕňajúcich reakcie na izoformy VEGF špecifické pre primáty a oftalmologickú farmakológiu. Táto línia sa bežne používa v testoch tvorby cievnych trubíc, testoch migrácie a experimentoch so stimuláciou VEGF.
- Tkanivo
- Cievnatka, sietnica
- Choroba
- Normálny endotélium sietnice a cievnatky (fetálny; netumorogénny)
- Miesto metastáz
- Neplatí (normálna bunková línia endoteliálnych buniek choroidálnej vrstvy sietnice plodu)
- Aplikácie
- Výskum očnej angiogenézy; vaskularizácia sietnice a cievnatky; hodnotenie anti-VEGF terapie (bevacizumab, ranibizumab); modelovanie AMD a diabetickej retinopatie; testy tvorby cievnych trubíc; vaskulárna permeabilita; model endotelu sietnice primátov z rodu NHP
02Klasifikácia
- Organizmus
- makak rhesus
- Sex
- Nešpecifikované
- Rastové vlastnosti
- Prívrženec
- Stav GMO
- Bez GMO
- Podrobnosti o štatúte GMO
- No genetic modification; wildtype rhesus macaque fetal retinal choroidal endothelial cell line
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- 1
03Charakteristiky
- Morfológia
- Epitelu podobné
- Typ bunky
- Endotelové bunky
- Doba zdvojnásobenia
- približne 24 až 36 hodín
04Identifikátory
- Citácia
- RF/6A (katalógové číslo Cytion 305150)
- Daňové identifikačné číslo NCBI
- 9544
- Cellosaurus
- CVCL_4552
05Prejav a náchylnosť
- Expresia proteínov
- Faktor Ⅷ, fibronektín
06Manipulácia a kultivácia
- Kultivačné médium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
- Inkubačná atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplnky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
- Disociačné činidlo
- Accutase
- Rozmnožovanie kultúr
- Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
- Pomer rozdelenia
- 1 až 5
- Hustota výsevu
- 1 až 2 × 10⁴ buniek/cm²
- Obnova kvapaliny
- 2 až 3-krát týždenne
- Zotavenie po rozmrazení
- Po rozmrazení naneste bunky na kultivačné misky v hustote 5 × 10⁴ buniek/cm² a pred prvou výmenou živného média počkajte aspoň 24 hodín, aby sa bunky priľnuli. Nedovoľte, aby kultúry dosiahli úplnú konfluenciu, pretože kontaktná inhibícia môže oslabiť endoteliálny fenotyp.
- Rozmrazovanie a kultivácia
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervácia
- Sterilita
Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.
Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.
- Mrazové médium
- Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
- Podmienky skladovania
Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.
- Dopravné podmienky
Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
08Darca
- Vek darcu
- Plod
- Etnická príslušnosť
- Neplatí (bunka z primáta iného ako človek; Macaca mulatta)
09Právne informácie a bezpečnosť
- Bezpečnostné opatrenia
- Pri plánovaní uskladnenia kryovírusu v kvapalnom dusíku na budúce rozmrazenie je potrebné dodržiavať prísne bezpečnostné opatrenia. Vhodné ochranné rukavice a odev sú nevyhnutné a počas prenosu zmrazených vzoriek do nádrže s tekutým dusíkom alebo z nej sa vyžaduje používanie tvárovej masky alebo ochranných okuliarov. Je to z dôvodu zníženia rizika poranenia v dôsledku možnej explózie kryovírusu pri vyberaní, ktorá môže mať za následok vymrštenie ostrých úlomkov.
- Záruka
V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste
Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke
- Je potrebná dohoda o prenose materiálu
- Áno