
- Vävnad
- Åderhålan, näthinnan
- Sjukdom
- Normalt endotel i näthinnans koroid (fostervävnad; icke-tumörbildande)
- Metastaseringsställe
- Ej tillämpligt (normal cellinje från fostrets näthinnans koroidala endotel)
Dokument
RF/6A
Cell line · Produktnummer 305150
RF/6A is a rhesus macaque (Macaca mulatta) retinal choroidal endothelial cell line established from fetal choroid and retina tissue. The line is grows as ...
Anpassning / Rekommendationer
- RF/6ACell line€550.00
01Allmän information
- Beskrivning
RF/6A är en cellinje av endotelceller från näthinnans koroid hos rhesusmakak (Macaca mulatta), som har etablerats från fostervävnad från koroid och näthinna. Cellinjen växer som ett vidhäftande monolager med epitelliknande morfologi. RF/6A-cellerna behåller viktiga endotelegenskaper, däribland uttryck av faktor VIII (von Willebrand-faktor), fibronektin och Weibel-Palade-granuler som kan detekteras med elektronmikroskopi – det sistnämnda bekräftar deras endotelidentitet. Cellinjen etablerades ursprungligen för studier av vaskularisering i näthinnan och koroiden och har fått bred användning som en endotelmodell från primater för forskning om okulär angiogenes.
RF/6A är användbar inom forskning om okulär angiogenes, studier av vaskularisering i näthinnan och åderhinnan, utvärdering av antiangiogena medel (VEGF-hämmare, bevacizumab, ranibizumab), modellering av åldersrelaterad makuladegeneration (AMD), biologin bakom diabetisk retinopati samt bedömning av vaskulär permeabilitet i ögats mikromiljö. Eftersom RF/6A härstammar från icke-mänskliga primater (NHP) ligger den närmare den mänskliga näthinnans vaskulära biologi än endotelmodeller från gnagare, särskilt för studier som rör primatspecifika VEGF-isoformresponser och okulär farmakologi. Stammen används ofta i rörbildningsanalyser, migrationsanalyser och VEGF-stimuleringsförsök.
- Vävnad
- Åderhålan, näthinnan
- Sjukdom
- Normalt endotel i näthinnans koroid (fostervävnad; icke-tumörbildande)
- Metastaseringsställe
- Ej tillämpligt (normal cellinje från fostrets näthinnans koroidala endotel)
- Ansökningar
- Forskning om okulär angiogenes; vaskularisering av näthinnan och åderhinnan; utvärdering av anti-VEGF-behandling (bevacizumab, ranibizumab); modellering av åldersrelaterad makuladegeneration (AMD) och diabetesretinopati; rörbildningsförsök; vaskulär permeabilitet; näthinneendotelmodell från NHP-primater
02Klassificering
- Organism
- Rhesusmakak
- Kön
- Ospecificerat
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- GMO-status
- Utan genetiskt modifierade organismer
- Detaljer om GMO-status
- No genetic modification; wildtype rhesus macaque fetal retinal choroidal endothelial cell line
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelliknande
- Celltyp
- Endoteliala celler
- Fördubblingstid
- ca 24 till 36 timmar
04Identifierare
- Källa
- RF/6A (Cytion katalognummer 305150)
- NCBI-skattenummer
- 9544
- Cellosaurus
- CVCL_4552
05Uttryck och mottaglighet
- Proteinexpression
- Faktor Ⅷ, fibronektin
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
- Uppdelningsförhållande
- 1 till 5
- Såtäthet
- 1 till 2 × 10⁴ celler/cm²
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Återhämtning efter upptining
- Efter upptining ska cellerna odlas ut med en täthet på 5 × 10⁴ celler/cm² och få vidhäfta i minst 24 timmar innan det första medielbytet. Låt inte odlingarna nå full konfluens, eftersom kontaktinhibering kan minska den endoteliala fenotypen.
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- Foster
- Etnicitet
- Ej tillämpligt (cellinje från icke-mänsklig primat; Macaca mulatta)
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja