Gå direkt till innehållet
RF/6A
Vävnad
Åderhålan, näthinnan
Sjukdom
Normalt endotel i näthinnans koroid (fostervävnad; icke-tumörbildande)
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (normal cellinje från fostrets näthinnans koroidala endotel)

RF/6A

Cell line · Produktnummer 305150

RF/6A is a rhesus macaque (Macaca mulatta) retinal choroidal endothelial cell line established from fetal choroid and retina tissue. The line is grows as ...

€550.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

RF/6A är en cellinje av endotelceller från näthinnans koroid hos rhesusmakak (Macaca mulatta), som har etablerats från fostervävnad från koroid och näthinna. Cellinjen växer som ett vidhäftande monolager med epitelliknande morfologi. RF/6A-cellerna behåller viktiga endotelegenskaper, däribland uttryck av faktor VIII (von Willebrand-faktor), fibronektin och Weibel-Palade-granuler som kan detekteras med elektronmikroskopi – det sistnämnda bekräftar deras endotelidentitet. Cellinjen etablerades ursprungligen för studier av vaskularisering i näthinnan och koroiden och har fått bred användning som en endotelmodell från primater för forskning om okulär angiogenes.

RF/6A är användbar inom forskning om okulär angiogenes, studier av vaskularisering i näthinnan och åderhinnan, utvärdering av antiangiogena medel (VEGF-hämmare, bevacizumab, ranibizumab), modellering av åldersrelaterad makuladegeneration (AMD), biologin bakom diabetisk retinopati samt bedömning av vaskulär permeabilitet i ögats mikromiljö. Eftersom RF/6A härstammar från icke-mänskliga primater (NHP) ligger den närmare den mänskliga näthinnans vaskulära biologi än endotelmodeller från gnagare, särskilt för studier som rör primatspecifika VEGF-isoformresponser och okulär farmakologi. Stammen används ofta i rörbildningsanalyser, migrationsanalyser och VEGF-stimuleringsförsök.

Vävnad
Åderhålan, näthinnan
Sjukdom
Normalt endotel i näthinnans koroid (fostervävnad; icke-tumörbildande)
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (normal cellinje från fostrets näthinnans koroidala endotel)
Ansökningar
Forskning om okulär angiogenes; vaskularisering av näthinnan och åderhinnan; utvärdering av anti-VEGF-behandling (bevacizumab, ranibizumab); modellering av åldersrelaterad makuladegeneration (AMD) och diabetesretinopati; rörbildningsförsök; vaskulär permeabilitet; näthinneendotelmodell från NHP-primater

02Klassificering

Organism
Rhesusmakak
Kön
Ospecificerat
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
Utan genetiskt modifierade organismer
Detaljer om GMO-status
No genetic modification; wildtype rhesus macaque fetal retinal choroidal endothelial cell line
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Celltyp
Endoteliala celler
Fördubblingstid
ca 24 till 36 timmar

04Identifierare

Källa
RF/6A (Cytion katalognummer 305150)
NCBI-skattenummer
9544
Cellosaurus
CVCL_4552

05Uttryck och mottaglighet

Proteinexpression
Faktor Ⅷ, fibronektin

06Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Uppdelningsförhållande
1 till 5
Såtäthet
1 till 2 × 10⁴ celler/cm²
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Efter upptining ska cellerna odlas ut med en täthet på 5 × 10⁴ celler/cm² och få vidhäfta i minst 24 timmar innan det första medielbytet. Låt inte odlingarna nå full konfluens, eftersom kontaktinhibering kan minska den endoteliala fenotypen.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
Foster
Etnicitet
Ej tillämpligt (cellinje från icke-mänsklig primat; Macaca mulatta)