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RF/6A
ティッシュ
脈絡膜、網膜
病気
正常な網膜脈絡膜内皮(胎児由来;非腫瘍性)
転移部位
該当なし(正常な胎児網膜脈絡膜内皮細胞株)

RF/6A

Cell line · 製品番号 305150

RF/6A is a rhesus macaque (Macaca mulatta) retinal choroidal endothelial cell line established from fetal choroid and retina tissue. The line is grows as ...

€550.00税・送料別

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01概要

説明

RF/6Aは、胎児の脈絡膜および網膜組織から樹立されたアカゲザル(Macaca mulatta)の網膜脈絡膜内皮細胞株である。 この細胞株は、上皮様形態を呈する付着性単層として増殖する。RF/6A細胞は、第VIII因子(フォン・ヴィレブランド因子)の発現、フィブロネクチン、および電子顕微鏡で検出可能なヴァイベル・パラデ顆粒など、主要な内皮細胞の特徴を保持しており、特に後者はその内皮細胞としての同一性を裏付けている。 この細胞株は、もともと網膜および脈絡膜の血管新生研究のために樹立されたものであり、眼の血管新生研究における霊長類の内皮モデルとして広く採用されている。

RF/6Aは、眼の血管新生研究、網膜および脈絡膜の血管新生に関する研究、抗血管新生剤(VEGF阻害剤、ベバシズマブ、ラニビズマブ)の評価、 加齢黄斑変性(AMD)のモデル化、糖尿病性網膜症の生物学的メカニズムの解明、および眼の微小環境における血管透過性の評価などに適用可能です。 RF/6Aは非ヒト霊長類(NHP)由来であるため、げっ歯類の血管内皮モデルよりもヒトの網膜血管生物学に近い特性を有しており、特に霊長類特有のVEGFアイソフォームの反応や眼の薬理学に関する研究において有用です。この系統は、管形成アッセイ、遊走アッセイ、およびVEGF刺激実験で広く使用されています。

ティッシュ
脈絡膜、網膜
病気
正常な網膜脈絡膜内皮(胎児由来;非腫瘍性)
転移部位
該当なし(正常な胎児網膜脈絡膜内皮細胞株)
用途
眼の血管新生に関する研究;網膜および脈絡膜の血管新生;抗VEGF療法の評価(ベバシズマブ、ラニビズマブ);加齢黄斑変性(AMD)および糖尿病性網膜症のモデル化;管形成アッセイ;血管透過性;非ヒト霊長類(NHP)の網膜内皮細胞モデル

02分類

生物
アカゲザル
セックス
未指定
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
非遺伝子組み換え
GMOのステータスに関する詳細
No genetic modification; wildtype rhesus macaque fetal retinal choroidal endothelial cell line
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
細胞の種類
内皮細胞
倍増時間
約24~36時間

04識別子

引用
RF/6A(Cytionカタログ番号 305150)
NCBI 納税者番号
9544
セロサウルス
CVCL_4552

05発現と感受性

タンパク質の発現
第Ⅷ因子、フィブロネクチン

06取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
分割比率
1~5
播種密度
1~2 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5 × 10⁴ 細胞/cm²の密度で播種し、最初の培地交換を行う前に、少なくとも24時間かけて細胞の付着を待ちます。接触抑制により内皮細胞の表現型が低下する可能性があるため、培養細胞が完全なコンフルエント状態に達しないようにしてください。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
胎児
民族
該当なし(ヒト以外の霊長類の細胞株;Macaca mulatta)