- Væv
- Årehinde, nethinde
- Sygdom
- Normalt endotel i nethinden og årehinden (foster; ikke-tumorfremkaldende)
- Metastasested
- Ikke relevant (normal cellelinje fra fosterets nethinde og årehinde)
Dokumenter
RF/6A
Cell line · Varenummer 305150
RF/6A is a rhesus macaque (Macaca mulatta) retinal choroidal endothelial cell line established from fetal choroid and retina tissue. The line is grows as ...
Tilpasning / Anbefalinger
- RF/6ACell line€550.00
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
RF/6A er en cellelinje af endotelceller fra nethinden og årehinden hos rhesusmakak (Macaca mulatta), der er etableret ud fra føtalt væv fra årehinden og nethinden. Cellelinjen vokser som et vedhæftende monolag med epitelagtig morfologi. RF/6A-celler bevarer vigtige endotelcellekarakteristika, herunder ekspression af faktor VIII (von Willebrand-faktor), fibronektin og Weibel-Palade-granuler, der kan påvises ved elektronmikroskopi — hvor sidstnævnte bekræfter deres endotelcelleidentitet. Linjen blev oprindeligt etableret til studier af vaskularisering i nethinden og årehinden og er blevet bredt anvendt som en primat-endotelmodel til forskning i okulær angiogenese.
RF/6A kan anvendes i forskning i okulær angiogenese, undersøgelser af vaskularisering i nethinden og årehinden, evaluering af antiangiogene midler (VEGF-hæmmere, bevacizumab, ranibizumab), modellering af aldersrelateret makuladegeneration (AMD), biologi ved diabetisk retinopati samt vurdering af vaskulær permeabilitet i det okulære mikromiljø. Da RF/6A stammer fra ikke-menneskelige primater (NHP), ligger den tættere på den menneskelige nethindens vaskulære biologi end endotelmodeller fra gnavere, især i forbindelse med undersøgelser, der involverer primatspecifikke VEGF-isoformresponser og okulær farmakologi. Linjen anvendes almindeligvis i rørdannelsesassays, migrationsassays og VEGF-stimuleringsforsøg.
- Væv
- Årehinde, nethinde
- Sygdom
- Normalt endotel i nethinden og årehinden (foster; ikke-tumorfremkaldende)
- Metastasested
- Ikke relevant (normal cellelinje fra fosterets nethinde og årehinde)
- Anvendelser
- Forskning i okulær angiogenese; vaskularisering af nethinden og årehinden; evaluering af anti-VEGF-behandling (bevacizumab, ranibizumab); modellering af AMD og diabetisk retinopati; rørdannelsesforsøg; vaskulær permeabilitet; nethindeendotelmodel hos NHP-primater
02Klassificering
- Organisme
- Rhesusmakak
- Køn
- Uspecificeret
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- GMO-status
- GMO-fri
- Oplysninger om GMO-status
- No genetic modification; wildtype rhesus macaque fetal retinal choroidal endothelial cell line
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Endotheliale celler
- Fordoblingstid
- ca. 24 til 36 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- RF/6A (Cytion-katalognummer 305150)
- NCBI-skattenummer
- 9544
- Cellosaurus
- CVCL_4552
05Udtryk og modtagelighed
- Proteinekspression
- Faktor Ⅷ, fibronektin
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Opdelingsforhold
- 1 til 5
- Såtæthed
- 1 til 2 × 10⁴ celler/cm²
- Væskeudskiftning
- 2 til 3 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
- Efter optøning udplades cellerne med en tæthed på 5 × 10⁴ celler/cm², og der skal gå mindst 24 timer, før det første medieskift foretages, så cellerne kan hæfte sig fast. Lad ikke kulturerne nå fuld konfluens, da kontaktinhibering kan reducere den endoteliale fænotype.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- Foster
- Etnisk tilhørsforhold
- Ikke relevant (cellelinje fra ikke-menneskelige primater; Macaca mulatta)
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja