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RF/6A
티슈
맥락막, 망막
질병
정상 망막 맥락막 내피 (태아; 비종양성)
전이 부위
해당 사항 없음 (정상 태아 망막 맥락막 내피 세포주)

RF/6A

Cell line · 제품 번호 305150

RF/6A is a rhesus macaque (Macaca mulatta) retinal choroidal endothelial cell line established from fetal choroid and retina tissue. The line is grows as ...

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01일반 정보

설명

RF/6A는 태아의 맥락막 및 망막 조직에서 확립된 레서스 원숭이(Macaca mulatta) 망막 맥락막 내피 세포주입니다. 이 세포주는 상피와 유사한 형태를 띠며 부착성 단층으로 증식합니다. RF/6A 세포는 제VIII인자(폰 빌레브란트 인자), 피브로넥틴의 발현은 물론, 전자현미경으로 관찰 가능한 바이벨-팔라데 과립 등 주요 내피 세포 특성을 유지하고 있으며, 특히 바이벨-팔라데 과립의 존재는 이 세포들이 내피 세포임을 확인해 줍니다. 이 세포주는 원래 망막 및 맥락막 혈관 신생 연구를 위해 확립되었으며, 안구 혈관 신생 연구를 위한 영장류 내피 모델로 널리 채택되어 왔습니다.

RF/6A는 안구 혈관신생 연구, 망막 및 맥락막 혈관 형성 연구, 항혈관신생제(VEGF 억제제, 베바시주맙, 라니비주맙) 평가, 노화 관련 황반변성(AMD) 모델링, 당뇨성 망막병증의 생물학적 기전 연구, 안구 미세환경 내 혈관 투과성 평가 등에 활용될 수 있습니다. 비인간 영장류(NHP) 유래인 RF/6A는 설치류 내피 세포 모델보다 인간 망막 혈관 생물학에 더 가깝기 때문에, 특히 영장류 특유의 VEGF 이소형 반응 및 안구 약리학을 다루는 연구에 유용합니다. 이 세포주는 관 형성 분석, 이동 분석, VEGF 자극 실험에 널리 사용됩니다.

티슈
맥락막, 망막
질병
정상 망막 맥락막 내피 (태아; 비종양성)
전이 부위
해당 사항 없음 (정상 태아 망막 맥락막 내피 세포주)
응용 분야
안구 혈관신생 연구; 망막 및 맥락막 혈관 형성; 항-VEGF 치료법 평가 (베바시주맙, 라니비주맙); 황반변성(AMD) 및 당뇨병성 망막병증 모델링; 관 형성 분석; 혈관 투과성; NHP 영장류 망막 내피 세포 모델

02분류

생물체
레서스 원숭이
성
미지정
성장 특성
준수자
유전자 변형 여부
비유전자변형
유전자 변형 생물(GMO) 여부 상세 정보
No genetic modification; wildtype rhesus macaque fetal retinal choroidal endothelial cell line
생물안전 등급
1

03특징

형태학
상피 유사
세포 유형
내피 세포
배가 시간
약 24~36시간

04식별자

인용
RF/6A (Cytion 카탈로그 번호 305150)
NCBI 세금 식별번호
9544
셀로사우루스
CVCL_4552

05발현 및 감수성

단백질 발현
인자 Ⅷ, 피브로넥틴

06취급 및 배양

배지
EMEM(MEM 이글), w: 2mM L-글루타민, w: 2.2g/L NaHCO3, w: EBSS(사이티온 제품 번호 820100a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS와 1% NEAA를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
분할 비율
1~5
파종 밀도
1~2 × 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
해동 후, 세포를 5 × 10⁴ 세포/cm²의 밀도로 배양 접시에 접종하고, 첫 번째 배지 교체 전까지 최소 24시간 동안 부착되도록 두십시오. 접촉 억제로 인해 내피 세포의 표현형이 저하될 수 있으므로, 배양 세포가 완전히 밀집된 상태가 되지 않도록 하십시오.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
태아
민족
해당 사항 없음 (비인간 영장류 세포주; Macaca mulatta)