
- Tkáň
- Cévnatka, sítnice
- Nemoc
- Normální endotel sítnice a cévnatky (fetální; netumorogenní)
- Místo metastázy
- Neplatí (normální buněčná linie endoteliálních buněk choroidální vrstvy sítnice plodu)
Dokumenty
RF/6A
Cell line · Číslo výrobku 305150
RF/6A is a rhesus macaque (Macaca mulatta) retinal choroidal endothelial cell line established from fetal choroid and retina tissue. The line is grows as ...
Přizpůsobení / Doporučení
- RF/6ACell line€550.00
01Obecné informace
- Popis
RF/6A je buněčná linie endoteliálních buněk sítnice a cévnatky makaka rhesus (Macaca mulatta), získaná z fetální tkáně cévnatky a sítnice. Tato buněčná linie roste jako adhezivní monovrstva s epiteliální morfologií. Buňky RF/6A si zachovávají klíčové endoteliální charakteristiky, včetně exprese faktoru VIII (von Willebrandův faktor), fibronektinu a Weibel-Paladeho granulí detekovatelných elektronovou mikroskopií – přičemž právě tyto granule potvrzují jejich endoteliální identitu. Tato buněčná linie byla původně vytvořena pro studium vaskularizace sítnice a cévnatky a je široce využívána jako model endotelu primátů pro výzkum oční angiogeneze.
RF/6A je použitelná ve výzkumu oční angiogeneze, ve studiích vaskularizace sítnice a cévnatky, při hodnocení antiangiogenních látek (inhibitorů VEGF, bevacizumabu, ranibizumabu), modelování věkem podmíněné makulární degenerace (AMD), biologie diabetické retinopatie a hodnocení vaskulární permeability v očním mikroprostředí. Díky svému původu z nehumánních primátů (NHP) je linie RF/6A blíže biologii cévní sítě lidské sítnice než endoteliální modely hlodavců, zejména pro studie zahrnující reakce na izoformy VEGF specifické pro primáty a oční farmakologii. Tato linie se běžně používá v testech tvorby trubiček, testech migrace a experimentech se stimulací VEGF.
- Tkáň
- Cévnatka, sítnice
- Nemoc
- Normální endotel sítnice a cévnatky (fetální; netumorogenní)
- Místo metastázy
- Neplatí (normální buněčná linie endoteliálních buněk choroidální vrstvy sítnice plodu)
- Aplikace
- Výzkum oční angiogeneze; vaskularizace sítnice a cévnatky; hodnocení terapie anti-VEGF (bevacizumab, ranibizumab); modelování AMD a diabetické retinopatie; testy tvorby trubiček; vaskulární permeabilita; model endotelu sítnice primátů z řádu NHP
02Klasifikace
- Organismus
- makak rhesus
- Sex
- Nespecifikováno
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Stav GMO
- Bez GMO
- Podrobnosti o statusu GMO
- No genetic modification; wildtype rhesus macaque fetal retinal choroidal endothelial cell line
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Epitelu podobné
- Typ buňky
- Endoteliální buňky
- Doba zdvojnásobení
- přibližně 24 až 36 hodin
04Identifikátory
- Citace
- RF/6A (katalogové číslo Cytion 305150)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 9544
- Cellosaurus
- CVCL_4552
05Exprese a náchylnost
- Exprese proteinů
- Faktor Ⅷ, fibronektin
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Poměr rozdělení
- 1 až 5
- Hustota výsevu
- 1 až 2 × 10⁴ buněk/cm²
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Zotavení po rozmrazení
- Po rozmrazení naneste buňky na kultivační misky v hustotě 5 × 10⁴ buněk/cm² a před první výměnou média vyčkejte alespoň 24 hodin, aby se buňky přichytily. Nedovolte, aby kultury dosáhly plné konfluence, protože kontaktní inhibice může oslabit endoteliální fenotyp.
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Věk dárce
- Plod
- Etnická příslušnost
- Nevztahuje se (buněčná linie primáta jiného než člověka; Macaca mulatta)
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano