Skip to content
RF/6A
Tissue
Màng mạch, võng mạc
Disease
Tế bào nội mô màng mạch võng mạc bình thường (của thai nhi; không gây ung thư)
Metastatic site
Không áp dụng (dòng tế bào nội mô màng mạch võng mạc thai nhi bình thường)

Documents

RF/6A

Cell line · Product number 305150

RF/6A is a rhesus macaque (Macaca mulatta) retinal choroidal endothelial cell line established from fetal choroid and retina tissue. The line is grows as ...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

RF/6A là dòng tế bào nội mô màng mạch và võng mạc của khỉ rhesus (Macaca mulatta), được phân lập từ mô màng mạch và võng mạc của thai nhi. Dòng tế bào này phát triển dưới dạng lớp đơn bám dính với hình thái giống biểu mô. Các tế bào RF/6A vẫn giữ được các đặc điểm chính của tế bào nội mô, bao gồm sự biểu hiện của Yếu tố VIII (yếu tố von Willebrand), fibronectin và các hạt Weibel-Palade có thể phát hiện được bằng kính hiển vi điện tử — yếu tố cuối cùng này xác nhận bản chất nội mô của chúng. Dòng tế bào này ban đầu được thiết lập để nghiên cứu quá trình hình thành mạch máu ở võng mạc và màng mạch, và đã được sử dụng rộng rãi như một mô hình tế bào nội mô linh trưởng cho nghiên cứu hình thành mạch máu ở mắt.

RF/6A có thể ứng dụng trong nghiên cứu hình thành mạch máu ở mắt, nghiên cứu quá trình hình thành mạch máu ở võng mạc và màng mạch, đánh giá các chất ức chế hình thành mạch máu (chất ức chế VEGF, bevacizumab, ranibizumab), mô hình hóa thoái hóa điểm vàng liên quan đến tuổi (AMD), sinh học bệnh võng mạc do tiểu đường, và đánh giá tính thấm mạch máu trong môi trường vi mô của mắt. Vì có nguồn gốc từ linh trưởng không phải người (NHP), RF/6A gần gũi hơn với sinh học mạch máu võng mạc của con người so với các mô hình tế bào nội mô của loài gặm nhấm, đặc biệt là đối với các nghiên cứu liên quan đến phản ứng của các đồng dạng VEGF đặc trưng ở linh trưởng và dược lý học mắt. Dòng tế bào này thường được sử dụng trong các thử nghiệm hình thành ống, thử nghiệm di chuyển và các thí nghiệm kích thích VEGF.

Tissue
Màng mạch, võng mạc
Disease
Tế bào nội mô màng mạch võng mạc bình thường (của thai nhi; không gây ung thư)
Metastatic site
Không áp dụng (dòng tế bào nội mô màng mạch võng mạc thai nhi bình thường)
Applications
Nghiên cứu về quá trình hình thành mạch máu ở mắt; quá trình hình thành mạch máu ở võng mạc và màng mạch; đánh giá liệu pháp ức chế VEGF (bevacizumab, ranibizumab); mô phỏng bệnh thoái hóa điểm vàng (AMD) và bệnh võng mạc do tiểu đường; các thử nghiệm hình thành ống; tính thấm mạch máu; mô hình tế bào nội mô võng mạc trên linh trưởng NHP

02Classification

Organism
Rhesus macaque
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype rhesus macaque fetal retinal choroidal endothelial cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Cell type
Tế bào nội mô
Doubling time
khoảng 24 đến 36 giờ

04Identifiers

Citation
RF/6A (Mã sản phẩm Cytion 305150)
NCBI TaxID
9544
Cellosaurus
CVCL_4552

05Expression and susceptibility

Protein expression
Yếu tố Ⅷ, Fibronectin

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), chứa: 2 mM L-Glutamine, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Split ratio
1 đến 5
Seeding density
1 đến 2 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 × 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào bám dính ít nhất 24 giờ trước khi thay môi trường nuôi cấy lần đầu. Không để các mẫu nuôi cấy đạt đến trạng thái phủ kín hoàn toàn vì hiện tượng ức chế tiếp xúc có thể làm giảm biểu hiện kiểu hình nội mô.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
Thai nhi
Ethnicity
Không áp dụng (dòng tế bào linh trưởng không phải người; Macaca mulatta)