
- Audums
- Dzīslenē, tīklene
- Slimība
- Normāls tīklenes horoidālais endotēlijs (augļa; netumorogēns)
- Metastāžu vieta
- Neattiecas (normāla augļa tīklenes un asinsvadu apvalka endotēlija šūnu līnija)
Dokumenti
RF/6A
Cell line · Preces numurs 305150
RF/6A is a rhesus macaque (Macaca mulatta) retinal choroidal endothelial cell line established from fetal choroid and retina tissue. The line is grows as ...
Pielāgošana / Ieteikumi
- RF/6ACell line€550.00
01Vispārīga informācija
- Apraksts
RF/6A ir rēzusmakaku (Macaca mulatta) tīklenes un coroīdas endotēlija šūnu līnija, kas izveidota no augļa coroīdas un tīklenes audiem. Šī līnija aug kā adhezīva monoslāņa kultūra ar epitēlijam līdzīgu morfoloģiju. RF/6A šūnas saglabā galvenās endotēlija īpašības, tostarp VIII faktora (von Willebrand faktora), fibronektīna un Weibel-Palade granulu ekspresiju, kas ir nosakāma ar elektronmikroskopiju — pēdējā no tām apstiprina šo šūnu endotēlija identitāti. Sākotnēji šī līnija tika izveidota tīklenes un horioīdas vaskularizācijas pētījumiem, un tā ir plaši pieņemta kā primātu endotēlija modelis acs angiogēnēzes pētījumiem.
RF/6A ir piemērota acs angiogēnēzes pētījumiem, tīklenes un horioīdas vaskularizācijas pētījumiem, antiangiogēno līdzekļu (VEGF inhibitori, bevacizumabs, ranibizumabs) novērtēšanai, ar vecumu saistītās makulas deģenerācijas (AMD) modelēšanai, diabētiskās retinopātijas bioloģijas izpētei un asinsvadu caurlaidības novērtēšanai acs mikrovidē. Tā kā RF/6A ir cēlusies no primātiem (NHP), tā ir tuvāka cilvēka tīklenes asinsvadu bioloģijai nekā grauzēju endotēlija modeļi, it īpaši pētījumos, kuros tiek izpētītas primātiem raksturīgās VEGF izoformu reakcijas un acu farmakoloģija. Šo šūnu līniju parasti izmanto cauruļveida struktūru veidošanās testos, migrācijas testos un VEGF stimulācijas eksperimentos.
- Audums
- Dzīslenē, tīklene
- Slimība
- Normāls tīklenes horoidālais endotēlijs (augļa; netumorogēns)
- Metastāžu vieta
- Neattiecas (normāla augļa tīklenes un asinsvadu apvalka endotēlija šūnu līnija)
- Pieteikumi
- Pētījumi par acu angiogēnēzi; tīklenes un horioīdas vaskularizācija; anti-VEGF terapijas novērtēšana (bevacizumabs, ranibizumabs); AMD un diabētiskās retinopātijas modelēšana; caurulīšu veidošanās testi; asinsvadu caurlaidība; NHP primātu tīklenes endotēlija modelis
02Klasifikācija
- Organisms
- Rēzusmakaks
- Sekss
- Nav norādīts
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- ĢMO statuss
- Bez ĢMO
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- No genetic modification; wildtype rhesus macaque fetal retinal choroidal endothelial cell line
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlijveidīgs
- Šūnu tips
- Endotēlija šūnas
- Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
- aptuveni 24 līdz 36 stundas
04Identifikatori
- Atsauce
- RF/6A (Cytion kataloga numurs 305150)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9544
- Cellosaurus
- CVCL_4552
05Pazīmes un uzņēmība
- Proteīnu ekspresija
- Faktors Ⅷ, fibronektīns
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sadalījuma attiecība
- no 1 līdz 5
- Sēšanas blīvums
- 1 līdz 2 × 10⁴ šūnas/cm²
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atgūšanās pēc atkusņa
- Pēc atkausēšanas izsējiet šūnas ar blīvumu 5 × 10⁴ šūnas/cm² un pirms pirmās barotnes nomaiņas ļaujiet tām vismaz 24 stundas pielipt pie virsmas. Neļaujiet kultūrām sasniegt pilnīgu konfluenci, jo kontakta inhibīcija var samazināt endotēlija fenotipu.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- Auglis
- Etniskā piederība
- Neattiecas (cilvēkam nepiederoša primātu šūnu līnija; Macaca mulatta)
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā