
- Doku
- Koroid, retina
- Hastalık
- Normal retina koroid endoteli (fetal; tümör oluşturmayan)
- Metastaz yeri
- Uygulanamaz (normal fetal retina koroid endotel hücre hattı)
Belgeler
RF/6A
Cell line · Ürün numarası 305150
RF/6A is a rhesus macaque (Macaca mulatta) retinal choroidal endothelial cell line established from fetal choroid and retina tissue. The line is grows as ...
Kişiselleştirme / Öneriler
- RF/6ACell line€550.00
01Genel bilgiler
- Açıklama
RF/6A, fetal koroid ve retina dokusundan elde edilen bir rhesus makak (Macaca mulatta) retina koroid endotel hücre hattıdır. Bu hücre hattı, epitel benzeri morfolojiye sahip, yapışkan bir tek tabaka halinde büyür. RF/6A hücreleri, Faktör VIII (von Willebrand faktörü), fibronektin ve elektron mikroskobu ile saptanabilen Weibel-Palade granüllerinin ekspresyonu dahil olmak üzere temel endotel özelliklerini korur; özellikle Weibel-Palade granülleri, bu hücrelerin endotel kimliğini teyit eder. Bu hücre hattı, başlangıçta retina ve koroid vaskülarizasyonu çalışmaları için oluşturulmuş olup, oküler anjiyogenez araştırmaları için bir primat endotel modeli olarak yaygın bir şekilde benimsenmiştir.
RF/6A, oküler anjiyogenez araştırmalarında, retina ve koroid vaskülarizasyonu çalışmalarında, anti-anjiyojenik ajanların (VEGF inhibitörleri, bevacizumab, ranibizumab) değerlendirilmesinde, yaşa bağlı maküler dejenerasyon (AMD) modellemesi, diyabetik retinopati biyolojisi ve oküler mikroortamdaki vasküler geçirgenliğin değerlendirilmesi alanlarında kullanılabilir. İnsan dışı primat (NHP) kökenli olması, RF/6A'yı kemirgen endotel modellerine kıyasla insan retina vasküler biyolojisine daha yakın kılar; bu durum özellikle primatlara özgü VEGF izoform yanıtlarını ve oküler farmakolojiyi içeren çalışmalarda geçerlidir. Bu hücre hattı, tüp oluşumu testlerinde, göç testlerinde ve VEGF stimülasyon deneylerinde yaygın olarak kullanılmaktadır.
- Doku
- Koroid, retina
- Hastalık
- Normal retina koroid endoteli (fetal; tümör oluşturmayan)
- Metastaz yeri
- Uygulanamaz (normal fetal retina koroid endotel hücre hattı)
- Uygulamalar
- Oküler anjiyogenez araştırmaları; retina ve koroid vaskülarizasyonu; anti-VEGF tedavisi değerlendirmesi (bevacizumab, ranibizumab); AMD ve diyabetik retinopati modellemesi; tüp oluşumu testleri; vasküler geçirgenlik; NHP primat retina endotel modeli
02Sınıflandırma
- Canlı
- Rhesus makak
- Cinsiyet
- Belirtilmemiş
- Büyüme özellikleri
- Bağlı
- GDO durumu
- GDO'suz
- GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
- No genetic modification; wildtype rhesus macaque fetal retinal choroidal endothelial cell line
- Biyogüvenlik seviyesi
- 1
03Özellikler
- Morfoloji
- Epitel benzeri
- Hücre türü
- Endotel hücreleri
- İki katına çıkma süresi
- yaklaşık 24 ila 36 saat
04Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- RF/6A (Cytion katalog numarası 305150)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 9544
- Cellosaurus
- CVCL_4552
05İfade ve duyarlılık
- Protein ekspresyonu
- Faktör Ⅷ, Fibronektin
06İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
- Ayrıştırma reaktifi
- Accutase
- Alt kültür oluşturma
- Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
- Bölünme oranı
- 1'den 5'e kadar
- Ekim yoğunluğu
- 1 ila 2 × 10⁴ hücre/cm²
- Sıvı değişimi
- haftada 2 ila 3 kez
- Çözülme sonrası toparlanma
- Çözüldükten sonra, hücreleri 5 × 10⁴ hücre/cm² yoğunluğunda plakalara ekleyin ve ilk besiyeri değişiminden önce hücrelerin yapışması için en az 24 saat bekleyin. Temas inhibisyonu endotel fenotipini azaltabileceğinden, kültürlerin tam konfluansa ulaşmasına izin vermeyin.
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Kısırlık
Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.
Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
08Bağışçı
- Bağışçının yaşı
- Fetüs
- Etnik köken
- Uygulanamaz (insan dışı primat hücre dizisi; Macaca mulatta)
09Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Malzeme Transfer Anlaşması gereklidir
- Evet