Премини към съдържанието
RF/6A
Тъкан
Хороидея, ретина
Заболяване
Нормален ендотелиум на ретината и хориоидеята (фетален; нетуморогенен)
Място на метастазите
Неприложимо (нормална клетъчна линия от ендотелиални клетки на хориоидеята на ретината на плода)

Документи

RF/6A

Cell line · Номер на продукта 305150

RF/6A is a rhesus macaque (Macaca mulatta) retinal choroidal endothelial cell line established from fetal choroid and retina tissue. The line is grows as ...

€550.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

RF/6A е клетъчна линия от ендотелиални клетки на ретината и хориоидеята на макак резус (Macaca mulatta), получена от фетална тъкан на хориоидеята и ретината. Линията расте като адхезивен монослой с епителиоподобна морфология. Клетките RF/6A запазват ключови ендотелиални характеристики, включително експресия на фактор VIII (фактор на фон Вилебранд), фибронектин и гранули на Вайбел-Паладе, откриваеми чрез електронна микроскопия — като последните потвърждават тяхната ендотелиална идентичност. Линията първоначално е създадена за изследвания на васкуларизацията на ретината и хориоидеята и е широко приета като ендотелиален модел на примати за изследвания в областта на очната ангиогенеза.

RF/6A намира приложение в изследванията на очната ангиогенеза, проучванията на васкуларизацията на ретината и хориоидеята, оценката на антиангиогенни средства (инхибитори на VEGF, бевацизумаб, ранибизумаб), моделиране на възрастовата макулна дегенерация (AMD), биологията на диабетната ретинопатия и оценка на съдовата пропускливост в очната микросреда. Произходът от нечовешки примати (NHP) прави RF/6A по-близка до биологията на ретиналните съдове при човека, отколкото ендотелните модели от гризачи, особено за изследвания, свързани с реакциите на специфични за приматите изоформи на VEGF и очна фармакология. Линията се използва често в тестове за образуване на тръбички, тестове за миграция и експерименти за стимулация с VEGF.

Тъкан
Хороидея, ретина
Заболяване
Нормален ендотелиум на ретината и хориоидеята (фетален; нетуморогенен)
Място на метастазите
Неприложимо (нормална клетъчна линия от ендотелиални клетки на хориоидеята на ретината на плода)
Приложения
Изследвания в областта на очната ангиогенеза; васкуларизация на ретината и хориоидеята; оценка на терапията с анти-VEGF средства (бевацизумаб, ранибизумаб); моделиране на възрастовата макулна дегенерация (AMD) и диабетната ретинопатия; тестове за образуване на тръбички; съдова пропускливост; модел на ендотелиалните клетки на ретината при примати от вида NHP

02Класификация

Организъм
Резус макак
Секс
Не е посочено
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
Без ГМО
Подробности относно статуса на ГМО
No genetic modification; wildtype rhesus macaque fetal retinal choroidal endothelial cell line
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Ендотелни клетки
Време за удвояване
приблизително 24 до 36 часа

04Идентификатори

Източник
RF/6A (каталожен номер на Cytion 305150)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9544
Целозавър
CVCL_4552

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
Фактор Ⅷ, фибронектин

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Коефициент на разделяне
от 1 до 5
Плътност на засяването
от 1 до 2 × 10⁴ клетки/см²
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване разпределете клетките в култура с плътност 5 × 10⁴ клетки/см² и изчакайте поне 24 часа за прилепване, преди да извършите първата смяна на средата. Не позволявайте културите да достигнат пълна конфлуентност, тъй като инхибицията на контакта може да намали ендотелния фенотип.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
Плод
Етническа принадлежност
Неприложимо (клетъчна линия от нечовешки примати; Macaca mulatta)