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AH-130
Gewebe
Leber
Krankheit
Hepatozelluläres Karzinom
Metastasenherd
Aszites
Synonyme
Yoshida AH-130, Yoshida AH130, AH130, AH 130, AH-130 Yoshida, AH130-TC, AH130/P

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AH-130

Cell line · Artikelnummer 500412

Yoshida et al. have established the ascites hepatoma by converting the aminoazo dyeinduced hepatoma of the rat into the ascetic form (Yoshida 1956). AH-130 i...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung
Yoshida et al. haben das Aszites-Hepatom etabliert, indem sie das Aminoazo-Farbstoff-induzierte Hepatom der Ratte in die Aszites-Form umwandelten (Yoshida 1956). AH-130 ist ein Stamm des Aszites-Hepatoms, der aus freien Tumorzellen besteht, nur kleine Inseln von Tumorinseln sind vorhanden. Die hier beschriebene Zelllinie wurde als In-vitro-Zellkultur aus diesem Yoshida-Stamm AH-130 des Asziteshepatoms hergestellt.
Gewebe
Leber
Krankheit
Hepatozelluläres Karzinom
Metastasenherd
Aszites
Anwendungen
Forschung zum hepatozellulären Karzinom; Biologie von Lebertumoren bei Ratten; Yoshida-Ascites-Hepatom-Modell; Untersuchungen zur Arzneimittelsensitivität und Zytotoxizität; Studien zur Anfälligkeit gegenüber Adenoviren; präklinische Modellierung von Leberkrebs bei Sprague-Dawley-Ratten; Biologie von adhärenten und in Suspension befindlichen Tumoren
Synonyme
  • Yoshida AH-130
  • Yoshida AH130
  • AH130
  • AH 130
  • AH-130 Yoshida
  • AH130-TC
  • AH130/P

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Sex
Nicht näher bezeichnet
Wachstumseigenschaften
Adhärente und Suspension
GVO-Status
Ohne Gentechnik
Angaben zum GVO-Status
No genetic modification; transplantable rat ascites hepatoma derived from aminoazo dye-induced primary hepatoma by Yoshida (1956)
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Runde Suspensionszellen, dreieckige adhärente Zellen
Zelltyp
Zellen des hepatozellulären Karzinoms (Hepatokarzinom)
Tumorauslösend
Ja, bei Wistar- und anderen Stämmen.
Verdopplungszeit
ca. 18 bis 24 Stunden (schnell wachsend; BD = „Fast“ bestätigt)

04Bezeichner

Quellenangabe
AH-130 (Cytion Katalognummer 500412)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_4367

05Expression und Anfälligkeit

Viren
RAP-Test negativ. .
Anfälligkeit für Viren
Hochempfindlich gegenüber humanen Adenoviren

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Die Suspensionszellen in einem 15-ml-Röhrchen sammeln und die anhaftenden Zellen vorsichtig mit PBS ohne Kalzium und Magnesium waschen (3-5 ml für T25-Kolben und 5-10 ml für T75-Kolben verwenden). Accutase auftragen (1-2 ml für T25-Kolben, 2,5 ml für T75-Kolben), um sicherzustellen, dass die Zellschicht vollständig bedeckt ist. Die Zellen 10 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubieren lassen. Nach der Inkubation sowohl die Suspension als auch die adhärenten Zellen mischen und zentrifugieren. Nach der Zentrifugation das Zellpellet vorsichtig resuspendieren und die Zellsuspension in neue Flaschen mit frischem Medium überführen.
Split-Verhältnis
1 bis 3
Aussaatdichte
2 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
Alle 3 bis 5 Tage
Erholung nach dem Auftauen
Schnell
Auftauen und Kultivierung

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
Sprague-Dawley
Alter des Spenders
Alter nicht spezifiziert
Ethnische Zugehörigkeit
Nicht zutreffend (Rattenzelllinie; Sprague-Dawley in Q)