Siirry sisältöön
AH-130
Kudos
Maksa
Sairaus
Maksasolusyöpä
Metastaasikohde
Askites
Synonyymit
Yoshida AH-130, Yoshida AH130, AH130, AH 130, AH-130 Yoshida, AH130-TC, AH130/P

Asiakirjat

AH-130

Cell line · Tuotenumero 500412

Yoshida et al. have established the ascites hepatoma by converting the aminoazo dyeinduced hepatoma of the rat into the ascetic form (Yoshida 1956). AH-130 i...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus
Yoshida ym. ovat luoneet askiteksen hepatooman muuntamalla rotan aminoatsoväriaineen aiheuttaman hepatooman askiteksen muotoon (Yoshida 1956). AH-130 on askitekanta, joka koostuu vapaista kasvainsoluista, ja siinä on vain pieniä kasvainsaarekkeita. Tässä kuvattu solulinja perustettiin in vitro -soluviljelynä tästä Yoshidan AH-130-kannasta peräisin olevasta askiteshepatoomasta.
Kudos
Maksa
Sairaus
Maksasolusyöpä
Metastaasikohde
Askites
Sovellukset
Hepatosellulaarisen karsinooman tutkimus; rotan maksakasvaimen biologia; Yoshidan askiteshepatomamalli; lääkeherkkyys- ja sytotoksisuustestaus; adenoviruksen herkkyystutkimukset; maksasyövän prekliininen mallintaminen Sprague-Dawley-rotilla; adheesiivisten ja suspensiokasvaimien biologia
Synonyymit
  • Yoshida AH-130
  • Yoshida AH130
  • AH130
  • AH 130
  • AH-130 Yoshida
  • AH130-TC
  • AH130/P

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Adheesio ja suspensio
GMO-status
GMO-vapaa
GMO-statuksen tiedot
No genetic modification; transplantable rat ascites hepatoma derived from aminoazo dye-induced primary hepatoma by Yoshida (1956)
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Pyöreät suspensiosolut, kolmionmuotoiset tarttuvat solut
Solutyyppi
Hepatosellulaarisen karsinooman solut (hepatokarsinooma)
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, Wistar- ja muissa kannoissa.
Kaksinkertaistumisaika
noin 18–24 tuntia (nopeasti kasvava; BD = nopea kasvu vahvistettu)

04Tunnisteet

Lähdeviite
AH-130 (Cytionin luettelonumero 500412)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_4367

05Ilmentyminen ja alttius

Virukset
RAP-testi negatiivinen. .
Viruksille altistuminen
Erittäin herkkä ihmisen adenoviruksille

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Kerää suspensiosolut 15 ml:n putkeen ja pese kiinni olevat solut varovasti PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml T25-pulloissa ja 5-10 ml T75-pulloissa). Levitä Accutasea (1-2 ml T25-pulloihin, 2,5 ml T75-pulloihin) varmistaen, että solukerros peittyy kokonaan. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen yhdistetään ja sentrifugoidaan sekä suspensio että adherentit solut. Sentrifugoinnin jälkeen solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensio uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–3
Kylvötiheys
2 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
3-5 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Nopea
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Sprague-Dawley
Luovuttajan ikä
Ikä määrittelemätön
Etnisyys
Ei sovelleta (rotan solulinja; Sprague-Dawley kohdassa Q)