Mine otse sisu juurde
HEK293-PSMA
Kude
Loote neerud
Haigus
Muundatud/immortaliseeritud; ei põhjusta kasvajate teket (HEK293-taust)

Dokumendid

HEK293-PSMA

Cell line · Toote number 305992

Vastutusest loobumine: Rakuliinide juures näidatud hinnad kehtivad ainult akadeemilistele ja mittetulunduslikele klientidele. Äriühingute puhul on hinnad...

€1,600.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Tellimusel valmistatud
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Vastutusest loobumine: Rakuliinide juures näidatud hinnad kehtivad ainult akadeemilistele ja mittetulunduslikele klientidele. Äriühingute puhul on hind umbes 6250 eurot.
Kui esindate äriühingut või ei ole kindel, milline kategooria teie puhul kehtib, palun võtke meiega ühendust.


HEK293-PSMA rakud on inimese embrüonaalsed neeru 293 (HEK293) rakud, mis on geneetiliselt muundatud stabiilselt ekspresseerima inimese eesnäärme-spetsiifilist membraanantigeeni (PSMA), tuntud ka kui glutamaatkarboksüpeptidaas II (FOLH1/GCPII). PSMA on II tüüpi transmembraanne glükoproteiin, millel on ensümaatiline foolhüdrolaasi ja karboksüpeptidaasi aktiivsus ning mida ekspresseeritakse tugevalt eesnäärmevähi korral, eriti kaugelearenenud, metastaatilise ja kastreerimisresistentset haiguse puhul. Lisaks eesnäärme pahaloomulistele kasvajatele on PSMA ekspressiooni täheldatud ka mitmesuguste tahkete kasvajate neovaskulatuuris. Tugeva kasvajaga seotud ekspressiooni ja ligipääsetava ekstratsellulaarse domeeni tõttu on PSMA-st saanud peamine sihtmärk diagnostilises kuvamises, radioligandravi, antikehapõhiste ravimite ja geneetiliselt muundatud immuunrakkude lähenemiste puhul.

HEK293-PSMA rakke kasutatakse laialdaselt onkoloogilistes uuringutes ja ravimite arendamisel PSMA-le suunatud monoklonaalsete antikehade, antikeha-ravimkonjugaatide, radiofarmatseutiliste ravimite, bispetsiifiliste T-rakkude aktivaatorite, CAR-T-rakkude ravimite ja väikemolekuliliste inhibiitorite iseloomustamiseks. Stabiilne rekombinantne ekspressioonisüsteem võimaldab kvantitatiivset analüüsi ligandi seondumise, retseptori hõivatuse, antigeeni tiheduse, internaliseerumise kineetika ja sihtmärgist sõltuva tsütotoksilisuse kohta. Need rakud on eriti väärtuslikud PSMA-suunatud kuvamissondide ja radioligandide platvormide hindamiseks, kuna PSMA läbib pärast ligandi seondumist tõhusa internaliseerumise. Lisarakenduste hulka kuuluvad voolutsütomeetria analüüside arendamine, omastamise uuringud, reporteranalüüsid, suure läbilaskevõimega sõelumine ja eesmärgipäraste manustamissüsteemide valideerimine eesnäärmevähi ravimite jaoks.

Kude
Loote neerud
Haigus
Muundatud/immortaliseeritud; ei põhjusta kasvajate teket (HEK293-taust)
Rakendused
PSMA-le suunatud antikehade, ADC-de ja radiofarmatseutiliste preparaatide arendamine; eesnäärmevähi ravimid; CAR-T-rakkude ravi; ADCC/CDC-analüüsid; voolutsütomeetria; eesnäärmevähi uurimine

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a PSMA (FOLH1) expression construct for prostate-specific membrane antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakud
Kahekordistumisaeg
u. 24–36 tundi

04Tunnused

Viide
HEK293-PSMA (Cytioni katalooginumber 305992)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_6G28

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
PSMA

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendage keskkonda 10% FBS-iga, 1 mM naatriumpüruvaadiga, 10 mM HEPES-iga, 1% NEAA-ga. Lisage geneetilistiini (G418-Sulfat), et saavutada lõplik kontsentratsioon 1 mg/ml.
Dissotsiatsioonireaktiiv
Trypsin-EDTA
Kultuuri edasikasvatamine
Rutiinseks adherentseks rakukultuuriks: Aspireerige adhereeruvatelt rakkudelt vana kultuurkeskkond ja peske neid PBS-ga, et eemaldada allesjäänud keskkond. Pärast PBS-i aspiratsiooni lisage sobiv kogus trüpsiini/EDTA lahust vastavalt kasvatusanuma suurusele (nt 1 ml T25 kolvi puhul, 3 ml T75 kolvi puhul) ja inkubeerige toatemperatuuril või 37 °C, kuni rakud eralduvad (5-10 minutit). Jälgige rakkude eraldumist mikroskoobi all ja koputage vajadusel õrnalt anumat, et rakud eralduksid. Kui rakud on eraldunud, lisage trüpsiini/EDTA inaktiveerimiseks täielikku söötmeainet, suspenseerige rakud ettevaatlikult uuesti ja kandke rakususpensiooni alikvoot uude, värsket söötmeainet sisaldavasse kasvatusanumasse. Asetage anum inkubaatorisse, mille temperatuur on 37 °C ja 5%CO2, ning vahetage söötme iga 2-3 päeva tagant.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
2 kuni 4 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist

Pärast sulatamist jagage rakud 1:2 kuni 1:3 T25 kolvidesse ja laske rakkudel taastuda külmutamisprotsessist ning lasta neil vähemalt 24 tunni jooksul kokku kleepuda.

Parima kinnitumise ja elujõulisuse saavutamiseks pärast rakkude sulatamist soovitame kasutada kollageeniga kaetud kolbisid või plaate, et pärast külmutamist algselt külvata. Kollageeniga katmine ei ole vajalik rakkude hilisemaks rutiinseks kasvatamiseks.

Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Loote