Preskoči na vsebino
HEK293-PSMA
Tkivo
Plodove ledvice
Bolezen
Preoblikovano/imortalizirano; netumorogeno (na podlagi celic HEK293)

Dokumenti

HEK293-PSMA

Cell line · Številka izdelka 305992

Opozorilo: Cene, prikazane za celične linije, veljajo izključno za akademske/neprofitne stranke. Za komercialne subjekte veljajo cene...

€1,600.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Po naročilu
1

01Splošne informacije

Opis

Opomba: Cene, prikazane za celične linije, veljajo izključno za akademsko in neprofitno javnost. Za komercialne subjekte znaša cena približno 6.250 €.
Če zastopate komercialni subjekt ali niste prepričani, v katero kategorijo spadate, vas prosimo, da nas kontaktirate.


Celice HEK293-PSMA so človeške embrionalne ledvične celice 293 (HEK293), ki so bile genetsko spremenjene za stabilno izražanje človeškega prostatičnega specifičnega membranskega antigena (PSMA), znanega tudi kot glutamat karboksipeptidaza II (FOLH1/GCPII). PSMA je transmembranni glikoprotein tipa II z encimsko aktivnostjo folatne hidrolaze in karboksipeptidaze, ki se močno izraža pri raku prostate, zlasti pri napredni, metastatski in kastracijsko odporni bolezni. Poleg malignih obolenj prostate je bila ekspresija PSMA opazovana tudi v neovaskulaturi različnih solidnih tumorjev. Zaradi močne ekspresije, povezane s tumorjem, in dostopne ekstracelularne domene je PSMA postal glavni cilj za diagnostično slikanje, terapijo z radioligandi, terapije na osnovi protiteles in pristope z inženirskimi imunskimi celicami.

Celice HEK293-PSMA se široko uporabljajo v onkoloških raziskavah in razvoju terapij za karakterizacijo monoklonskih protiteles, usmerjenih v PSMA, konjugatov protiteles in zdravil, radiofarmacevtskih sredstev, bispecifičnih aktivatorjev T-celic, terapij s CAR-T-celicami in inhibitorjev majhnih molekul. Stabilen rekombinantni ekspresijski sistem omogoča kvantitativno analizo vezave liganda, zasedenosti receptorja, gostote antigena, kinetike internalizacije in ciljno odvisne citotoksičnosti. Te celice so še posebej dragocene za ocenjevanje sond za slikanje, usmerjenih v PSMA, in platform za radioligande, saj PSMA po vezavi liganda učinkovito internalizira. Dodatne aplikacije vključujejo razvoj testov s pretočno citometrijo, študije privzema, reporterne teste, presejanje z visoko zmogljivostjo in validacijo sistemov za ciljno dostavo za terapije raka prostate.

Tkivo
Plodove ledvice
Bolezen
Preoblikovano/imortalizirano; netumorogeno (na podlagi celic HEK293)
Uporaba
Razvoj protiteles, ADC in radiofarmacevtskih pripravkov, usmerjenih proti PSMA; zdravljenje raka prostate; terapija s CAR-T-celicami; testi ADCC/CDC; pretočna citometrija; raziskave raka prostate

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a PSMA (FOLH1) expression construct for prostate-specific membrane antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Epitelijske celice
Čas podvojitve
približno 24–36 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HEK293-PSMA (kataloška številka Cytion 305992)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6G28

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
PSMA

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 1 mM natrijevega piruvata, 10 mM HEPES, 1 % NEAA. Dodajte geneticin (G418-Sulfat), da dosežete končno koncentracijo 1 mg/ml.
Reagenca za disociacijo
Tripsin-EDTA
Preusmeritev v drugo kulturo
Za rutinsko gojenje adherentnih celic: Iz adherentnih celic odsesajte staro gojišče in jih sperite s PBS, da odstranite preostalo gojišče. Po odsesanju PBS dodajte ustrezno količino raztopine tripsina/EDTA glede na velikost posode za gojenje (npr. 1 ml za bučko T25, 3 ml za bučko T75) in inkubirajte pri sobni temperaturi ali 37 °C, dokler se celice ne ločijo (5-10 minut). Odlepitev spremljajte pod mikroskopom in po potrebi nežno potrkajte posodo, da se celice sprostijo. Ko se celice odcepijo, dodajte popolno gojišče za inaktivacijo tripsina/EDTA, nežno ponovno suspendirajte celice in prenesite alikvot celične suspenzije v novo posodo za gojenje s svežim gojiščem. Posodo postavite v inkubator, nastavljen na 37 °C s 5 %CO2, in gojišče zamenjajte vsake 2 do 3 dni.
Razmerje delitve
1 do 5
Gostota setve
2 do 4 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju

Po odmrznitvi celice razdelite v razmerju 1:2 do 1:3 v bučke T25 in pustite, da si celice opomorejo od postopka zamrzovanja in se zlepijo vsaj 24 ur.

Za najboljšo pritrditev in sposobnost preživetja celic po odmrznitvi priporočamo, da za začetno sejanje po kriopreobnovitvi uporabite s kolagenom prevlečene bučke ali plošče. Za poznejše rutinsko gojenje celic kolagenska prevleka ni potrebna.

Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Plod