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Tissu
Rein, canal collecteur cortical
Synonymes
M1-CCD

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M-1

Cell line · Référence du produit 305261

€550.00hors taxes et frais de port
En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire M-1 est un modèle épithélial bien caractérisé dérivé du rein d'une souris adulte transgénique. Plus précisément, les cellules M-1 proviennent de l'épithélium du canal collecteur cortical et conservent de nombreuses caractéristiques différenciées de ce segment du néphron. Ces cellules expriment des marqueurs typiques des cellules du canal collecteur cortical, notamment les canaux sodiques épithéliaux (ENaC), les aquaporines et les protéines de jonction serrée, ce qui en fait un modèle in vitro largement utilisé pour la physiologie rénale, le transport des ions et les études sur la polarité épithéliale.

Sur le plan fonctionnel, les cellules M-1 présentent une résistance transépithéliale élevée et des propriétés de transport ionique vectoriel, qui sont essentielles pour étudier la réabsorption du sodium régulée par l'aldostérone et le transport de l'eau médié par la vasopressine. Selon la caractérisation fondamentale de Stoos et al, les cellules M-1 forment des monocouches polarisées sur des supports perméables et montrent une réactivité appropriée aux stimuli hormonaux, tels que la dexaméthasone et l'aldostérone, qui régulent l'expression et l'activité des protéines de transport. Ces caractéristiques rendent les cellules M-1 particulièrement précieuses pour disséquer les mécanismes de manipulation des électrolytes et de signalisation cellulaire dans les cellules épithéliales rénales.

En outre, les cellules M-1 ont été validées dans des études plus récentes, y compris l'authentification génétique à l'aide du profilage STR pour les lignées cellulaires de souris. Cela souligne leur pertinence et leur fiabilité dans la recherche contemporaine en physiologie rénale. Leur capacité à récapituler les comportements in vivo dans des conditions contrôlées en a fait un standard dans les études sur la fonction épithéliale, la néphrotoxicité et la modélisation des maladies rénales.

Tissu
Rein, canal collecteur cortical
Synonymes
  • M1-CCD

02Classification

Organisme
Souris
Sexe
Non précisé
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale

04Identifiants

Référence
M-1 (numéro de catalogue Cytion 305261)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_8786

05Expression et sensibilité

Virus
Virus simien 40 (SV40)

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 5% de FBS, 5 µM dexaméthasone
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
Tg(SV40E)Bri/7 transgénique
Âge du donneur
Non spécifié