Gå direkt till innehållet
Vävnad
Njure, kortikal samlingsgång
Synonymer
M1-CCD

M-1

Cell line · Produktnummer 305261

€550.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

M-1-cellinjen är en väl karakteriserad epitelmodell som härrör från njuren hos en transgen vuxen mus. M-1-cellerna härstammar från epitelet i den kortikala samlingsrännan och har kvar många av de differentierade egenskaperna hos detta nefronsegment. Dessa celler uttrycker markörer som är typiska för kortikala samlingsrörsceller, inklusive epiteliala natriumkanaler (ENaC), aquaporiner och tight junction-proteiner, vilket gör dem till en allmänt använd in vitro-modell för njurfysiologi, jontransport och epiteliala polaritetsstudier.

Funktionellt uppvisar M-1-cellerna högt transepitelialt motstånd och vektoriella jontransportegenskaper, vilket är avgörande för att studera aldosteronreglerad natriumreabsorption och vasopressinmedierad vattentransport. Enligt den grundläggande karakteriseringen av Stoos et al. bildar M-1-celler polariserade monolager på permeabla underlag och uppvisar lämplig respons på hormonella stimuli, såsom dexametason och aldosteron, som reglerar transportproteinernas uttryck och aktivitet. Dessa egenskaper gör M-1-celler särskilt värdefulla för att dissekera mekanismer för elektrolythantering och cellulär signalering i njurepitelceller.

M-1-cellerna har dessutom validerats i nyare studier, bland annat genom genetisk autentisering med hjälp av STR-profilering för cellinjer från mus. Detta understryker deras fortsatta relevans och tillförlitlighet i modern njurfysiologisk forskning. Deras förmåga att rekapitulera in vivo-liknande beteenden under kontrollerade förhållanden har etablerat dem som en standard i studier av epitelial funktion, nefrotoxicitet och modellering av njursjukdomar.

Vävnad
Njure, kortikal samlingsgång
Synonymer
  • M1-CCD

02Klassificering

Organism
Mus
Kön
Ospecificerat
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifierare

Källa
M-1 (Cytion katalognummer 305261)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_8786

05Uttryck och mottaglighet

Virus
Simianvirus 40 (SV40)

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 5% FBS, 5 µM dexametason
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Ras / underart
Tg(SV40E)Bri/7 transgena
Donatorns ålder
Ospecificerad