Skip to content
Tissue
Thận, ống thu thập vỏ thận
Synonyms
M1-CCD

Documents

M-1

Cell line · Product number 305261

€550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào M-1 là một mô hình biểu mô được đặc trưng rõ ràng, được phân lập từ thận của chuột biến đổi gen trưởng thành. Cụ thể, các tế bào M-1 có nguồn gốc từ biểu mô ống thu thập vỏ thận và giữ lại nhiều đặc điểm biệt hóa của đoạn nephron này. Các tế bào này biểu hiện các dấu hiệu đặc trưng của tế bào ống thu thập vỏ thận, bao gồm kênh natri biểu mô (ENaC), aquaporins và protein liên kết chặt chẽ, khiến chúng trở thành mô hình in vitro phổ biến cho các nghiên cứu về sinh lý thận, vận chuyển ion và cực tính biểu mô.

Về mặt chức năng, các tế bào M-1 thể hiện điện trở xuyên biểu mô cao và tính chất vận chuyển ion có hướng, điều này rất quan trọng cho việc nghiên cứu tái hấp thu natri được điều hòa bởi aldosterone và vận chuyển nước do vasopressin điều hòa. Theo mô tả cơ bản của Stoos et al., các tế bào M-1 hình thành lớp đơn phân cực trên các chất nền thấm và thể hiện phản ứng thích hợp với các kích thích hormone như dexamethasone và aldosterone, điều chỉnh biểu hiện và hoạt động của các protein vận chuyển. Các đặc điểm này khiến các tế bào M-1 đặc biệt có giá trị trong việc phân tích cơ chế xử lý điện giải và tín hiệu tế bào trong các tế bào biểu mô thận.

Hơn nữa, tế bào M-1 đã được xác nhận trong các nghiên cứu gần đây, bao gồm xác thực di truyền bằng phương pháp phân tích STR cho dòng tế bào chuột. Điều này nhấn mạnh tính liên quan và độ tin cậy của chúng trong nghiên cứu sinh lý thận hiện đại. Khả năng tái tạo các hành vi tương tự như trong cơ thể sống dưới điều kiện kiểm soát đã giúp chúng trở thành tiêu chuẩn trong các nghiên cứu về chức năng biểu mô, độc tính thận và mô hình bệnh thận.

Tissue
Thận, ống thu thập vỏ thận
Synonyms
  • M1-CCD

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Thượng bì

04Identifiers

Citation
M-1 (Số catalog Cytion 305261)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_8786

05Expression and susceptibility

Viruses
Virus khỉ 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 5% huyết thanh bò (FBS) và 5 µM dexamethasone
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
Tg(SV40E)Bri/7 chuyển gen
Donor age
Không xác định