- Ιστός
- Νεφρός, φλοιώδης συλλεκτικός πόρος
- Συνώνυμα
- M1-CCD
Έγγραφα
M-1
Cell line · Αριθμός προϊόντος 305261
Προσαρμογή / Προτάσεις
- M-1Cell line€550.00
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
01Γενικές πληροφορίες
- Περιγραφή
Η κυτταρική σειρά M-1 είναι ένα καλά χαρακτηρισμένο επιθηλιακό μοντέλο που προέρχεται από το νεφρό ενός διαγονιδιακού ενήλικου ποντικού. Συγκεκριμένα, τα κύτταρα Μ-1 προέρχονται από το επιθήλιο του φλοιώδους συλλεκτικού πόρου και διατηρούν πολλά διαφοροποιημένα χαρακτηριστικά αυτού του τμήματος του νεφρώνα. Τα κύτταρα αυτά εκφράζουν δείκτες τυπικούς για τα κύτταρα του φλοιώδους συλλεκτικού πόρου, συμπεριλαμβανομένων των επιθηλιακών διαύλων νατρίου (ENaC), των ακουαπορινών και των πρωτεϊνών στενής σύνδεσης, καθιστώντας τα ένα ευρέως χρησιμοποιούμενο in vitro μοντέλο για μελέτες νεφρικής φυσιολογίας, μεταφοράς ιόντων και επιθηλιακής πολικότητας.
Λειτουργικά, τα κύτταρα Μ-1 παρουσιάζουν υψηλή διαπεπτιλιακή αντίσταση και ιδιότητες μεταφοράς ιόντων με διανυσματικά μέσα, οι οποίες είναι κρίσιμες για τη μελέτη της επαναρρόφησης νατρίου που ρυθμίζεται από την αλδοστερόνη και της μεταφοράς νερού που μεσολαβείται από τη βαζοπρεσίνη. Σύμφωνα με τον θεμελιώδη χαρακτηρισμό από τους Stoos et al., τα κύτταρα Μ-1 σχηματίζουν πολωμένες μονοστρώσεις σε διαπερατά υποστρώματα και παρουσιάζουν κατάλληλη ανταπόκριση σε ορμονικά ερεθίσματα, όπως η δεξαμεθαζόνη και η αλδοστερόνη, που ρυθμίζουν την έκφραση και τη δραστηριότητα των πρωτεϊνών μεταφοράς. Αυτά τα χαρακτηριστικά καθιστούν τα κύτταρα Μ-1 ιδιαίτερα πολύτιμα για την ανάλυση των μηχανισμών χειρισμού των ηλεκτρολυτών και της κυτταρικής σηματοδότησης στα επιθηλιακά κύτταρα των νεφρών.
Επιπλέον, τα κύτταρα M-1 έχουν επικυρωθεί σε πιο πρόσφατες μελέτες, συμπεριλαμβανομένης της γενετικής πιστοποίησης με τη χρήση προφίλ STR για κυτταρικές σειρές ποντικών. Αυτό υπογραμμίζει τη συνεχή σημασία και αξιοπιστία τους στη σύγχρονη έρευνα της νεφρικής φυσιολογίας. Η ικανότητά τους να αναπαράγουν in vivo-like συμπεριφορές υπό ελεγχόμενες συνθήκες τα έχει καθιερώσει ως πρότυπο στις μελέτες για την επιθηλιακή λειτουργία, τη νεφροτοξικότητα και τη μοντελοποίηση νεφρικών ασθενειών.
- Ιστός
- Νεφρός, φλοιώδης συλλεκτικός πόρος
- Συνώνυμα
- M1-CCD
02Ταξινόμηση
- Οργανισμός
- Ποντίκι
- Σεξ
- Μη καθορισμένο
- Ιδιότητες ανάπτυξης
- Πιστός
- Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
- GMO-S1
- Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
- GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- 1
03Χαρακτηριστικά
- Μορφολογία
- Επιθηλιακό
04Αναγνωριστικά
- Παραπομπή
- M-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 305261)
- Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
- 10090
- Κελλοσαύρος
- CVCL_8786
05Έκφραση και ευαισθησία
- Ιοί
- Ιός των πιθήκων 40 (SV40)
06Χειρισμός και καλλιέργεια
- Θρεπτικό μέσο
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
- Ατμόσφαιρα επώασης
37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.
- Συμπληρώματα
- Συμπληρώστε το μέσο με 5% FBS, 5 μΜ δεξαμεθαζόνης
- Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
- Accutase
- Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
- Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
- Απόψυξη και καλλιέργεια
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση
- Στειρότητα
Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.
Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.
- Μέσο κατάψυξης
- Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
- Συνθήκες αποθήκευσης
Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.
- Όροι αποστολής
Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.
08Δωρητής
- Φυλή / υποείδος
- Tg(SV40E)Bri/7 διαγονιδιακά
- Ηλικία δωρητή
- Απροσδιόριστο
09Νομικά θέματα και ασφάλεια
- Μέτρα ασφαλείας
- Όταν σχεδιάζετε να αποθηκεύσετε ένα κρυοφιαλίδιο σε υγρό άζωτο για μελλοντική απόψυξη, είναι υποχρεωτικό να τηρείτε αυστηρά μέτρα ασφαλείας. Τα κατάλληλα προστατευτικά γάντια και ο κατάλληλος προστατευτικός ρουχισμός είναι απαραίτητα, ενώ απαιτείται η χρήση μάσκας προσώπου ή γυαλιών ασφαλείας κατά τη μεταφορά κατεψυγμένων δειγμάτων προς ή από τη δεξαμενή υγρού αζώτου. Αυτό γίνεται για να μετριαστεί ο κίνδυνος τραυματισμού από πιθανές εκρήξεις κρυοσωλήνων κατά την απομάκρυνση, οι οποίες μπορεί να οδηγήσουν στην προβολή αιχμηρών θραυσμάτων.
- Εγγύηση
Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος
Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης
- Απαιτείται συμφωνία μεταφοράς υλικού
- Ναι