Μετάβαση στο περιεχόμενο
Ιστός
Νεφρός, φλοιώδης συλλεκτικός πόρος
Συνώνυμα
M1-CCD

Έγγραφα

M-1

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305261

€550.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά M-1 είναι ένα καλά χαρακτηρισμένο επιθηλιακό μοντέλο που προέρχεται από το νεφρό ενός διαγονιδιακού ενήλικου ποντικού. Συγκεκριμένα, τα κύτταρα Μ-1 προέρχονται από το επιθήλιο του φλοιώδους συλλεκτικού πόρου και διατηρούν πολλά διαφοροποιημένα χαρακτηριστικά αυτού του τμήματος του νεφρώνα. Τα κύτταρα αυτά εκφράζουν δείκτες τυπικούς για τα κύτταρα του φλοιώδους συλλεκτικού πόρου, συμπεριλαμβανομένων των επιθηλιακών διαύλων νατρίου (ENaC), των ακουαπορινών και των πρωτεϊνών στενής σύνδεσης, καθιστώντας τα ένα ευρέως χρησιμοποιούμενο in vitro μοντέλο για μελέτες νεφρικής φυσιολογίας, μεταφοράς ιόντων και επιθηλιακής πολικότητας.

Λειτουργικά, τα κύτταρα Μ-1 παρουσιάζουν υψηλή διαπεπτιλιακή αντίσταση και ιδιότητες μεταφοράς ιόντων με διανυσματικά μέσα, οι οποίες είναι κρίσιμες για τη μελέτη της επαναρρόφησης νατρίου που ρυθμίζεται από την αλδοστερόνη και της μεταφοράς νερού που μεσολαβείται από τη βαζοπρεσίνη. Σύμφωνα με τον θεμελιώδη χαρακτηρισμό από τους Stoos et al., τα κύτταρα Μ-1 σχηματίζουν πολωμένες μονοστρώσεις σε διαπερατά υποστρώματα και παρουσιάζουν κατάλληλη ανταπόκριση σε ορμονικά ερεθίσματα, όπως η δεξαμεθαζόνη και η αλδοστερόνη, που ρυθμίζουν την έκφραση και τη δραστηριότητα των πρωτεϊνών μεταφοράς. Αυτά τα χαρακτηριστικά καθιστούν τα κύτταρα Μ-1 ιδιαίτερα πολύτιμα για την ανάλυση των μηχανισμών χειρισμού των ηλεκτρολυτών και της κυτταρικής σηματοδότησης στα επιθηλιακά κύτταρα των νεφρών.

Επιπλέον, τα κύτταρα M-1 έχουν επικυρωθεί σε πιο πρόσφατες μελέτες, συμπεριλαμβανομένης της γενετικής πιστοποίησης με τη χρήση προφίλ STR για κυτταρικές σειρές ποντικών. Αυτό υπογραμμίζει τη συνεχή σημασία και αξιοπιστία τους στη σύγχρονη έρευνα της νεφρικής φυσιολογίας. Η ικανότητά τους να αναπαράγουν in vivo-like συμπεριφορές υπό ελεγχόμενες συνθήκες τα έχει καθιερώσει ως πρότυπο στις μελέτες για την επιθηλιακή λειτουργία, τη νεφροτοξικότητα και τη μοντελοποίηση νεφρικών ασθενειών.

Ιστός
Νεφρός, φλοιώδης συλλεκτικός πόρος
Συνώνυμα
  • M1-CCD

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Μη καθορισμένο
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
M-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 305261)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_8786

05Έκφραση και ευαισθησία

Ιοί
Ιός των πιθήκων 40 (SV40)

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 5% FBS, 5 μΜ δεξαμεθαζόνης
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
Tg(SV40E)Bri/7 διαγονιδιακά
Ηλικία δωρητή
Απροσδιόριστο