- Tkáň
- Ledvina, korový sběrný kanálek
- Synonyma
- M1-CCD
Dokumenty
M-1
Cell line · Číslo výrobku 305261
Přizpůsobení / Doporučení
- M-1Cell line€550.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
Buněčná linie M-1 je dobře charakterizovaný epiteliální model odvozený z ledvin transgenní dospělé myši. Konkrétně buňky M-1 pocházejí z kortikálního epitelu sběrného kanálku a zachovávají si mnoho diferencovaných znaků tohoto segmentu nefronu. Tyto buňky exprimují markery typické pro buňky kortikálního sběrného kanálku, včetně epiteliálních sodíkových kanálů (ENaC), akvaporinů a proteinů těsných spojů, a jsou tak široce používaným in vitro modelem pro studium fyziologie ledvin, transportu iontů a epiteliální polarity.
Z funkčního hlediska vykazují buňky M-1 vysoký transepiteliální odpor a vektoriální vlastnosti transportu iontů, které jsou rozhodující pro studium aldosteronem regulované reabsorpce sodíku a vazopresinem zprostředkovaného transportu vody. Podle základní charakteristiky Stoose a spol. tvoří buňky M-1 polarizované monovrstvy na propustných nosičích a vykazují odpovídající reaktivitu na hormonální podněty, jako je dexametazon a aldosteron, které regulují expresi a aktivitu transportních proteinů. Díky těmto vlastnostem jsou buňky M-1 zvláště cenné při zkoumání mechanismů manipulace s elektrolyty a buněčné signalizace v epiteliálních buňkách ledvin.
Buňky M-1 byly navíc ověřeny v novějších studiích, včetně genetického ověření pomocí profilování STR pro myší buněčné linie. To podtrhuje jejich trvalý význam a spolehlivost v současném výzkumu fyziologie ledvin. Jejich schopnost rekapitulovat chování podobné chování in vivo v kontrolovaných podmínkách je zavedla jako standard ve studiích epiteliálních funkcí, nefrotoxicity a modelování onemocnění ledvin.
- Tkáň
- Ledvina, korový sběrný kanálek
- Synonyma
- M1-CCD
02Klasifikace
- Organismus
- Myš
- Sex
- Nespecifikováno
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Stav GMO
- GMO-S1
- Podrobnosti o statusu GMO
- GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Epitelové
04Identifikátory
- Citace
- M-1 (katalogové číslo Cytion 305261)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_8786
05Exprese a náchylnost
- Viry
- Simian virus 40 (SV40)
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 5 % FBS, 5 µM dexametazonu
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Plemeno / poddruh
- Tg(SV40E)Bri/7 transgenní
- Věk dárce
- Nespecifikováno
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano