Langsung ke isi
Tisu
Ginjal, saluran pengumpul kortikal
Sinonim
M1-CCD

Dokumen

M-1

Cell line · Nomor produk 305261

€550.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel M-1 adalah model epitel yang dikarakterisasi dengan baik yang berasal dari ginjal tikus dewasa transgenik. Secara khusus, sel M-1 berasal dari epitel duktus pengumpul kortikal dan mempertahankan banyak ciri khas segmen nefron ini. Sel-sel ini mengekspresikan penanda yang khas dari sel duktus pengumpul kortikal, termasuk saluran natrium epitel (ENaC), aquaporin, dan protein persimpangan yang rapat, sehingga menjadikannya model in vitro yang banyak digunakan untuk fisiologi ginjal, transpor ion, dan studi polaritas epitel.

Secara fungsional, sel M-1 menunjukkan resistensi transepitel yang tinggi dan sifat transpor ion vektorial, yang sangat penting untuk mempelajari reabsorpsi natrium yang diatur oleh aldosteron dan transpor air yang diperantarai oleh vasopresin. Menurut karakterisasi dasar oleh Stoos dkk., sel M-1 membentuk monolayer terpolarisasi pada penyangga yang permeabel dan menunjukkan respons yang sesuai terhadap rangsangan hormonal, seperti deksametason dan aldosteron, yang mengatur ekspresi dan aktivitas protein transpor. Fitur-fitur ini membuat sel M-1 sangat berharga dalam membedah mekanisme penanganan elektrolit dan pensinyalan seluler pada sel epitel ginjal.

Selain itu, sel M-1 telah divalidasi dalam penelitian yang lebih baru, termasuk otentikasi genetik menggunakan profil STR untuk garis sel tikus. Hal ini menggarisbawahi relevansi dan keandalannya yang berkelanjutan dalam penelitian fisiologi ginjal kontemporer. Kemampuan mereka untuk merekapitulasi perilaku seperti in vivo dalam kondisi yang terkendali telah menjadikannya sebagai standar dalam studi tentang fungsi epitel, nefrotoksisitas, dan pemodelan penyakit ginjal.

Tisu
Ginjal, saluran pengumpul kortikal
Sinonim
  • M1-CCD

02Klasifikasi

Organisme
Tikus
Seks
Tidak ditentukan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Epitel

04Pengidentifikasi

Referensi
M-1 (Nomor katalog Cytion 305261)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_8786

05Ekspresi dan kerentanan

Virus
Virus Simian 40 (SV40)

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 5% FBS, 5 µM deksametason
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Jenis / subspesies
Tg (SV40E) Bri/7 transgenik
Usia donor
Tidak ditentukan