Skip to content
Tissue
כליה, צינור איסוף קליפת המוח
Synonyms
M1-CCD

Documents

M-1

Cell line · Product number 305261

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים M-1 הוא מודל אפיתל מאופיין היטב, שמקורו בכליה של עכבר בוגר מהונדס גנטית. באופן ספציפי, תאי M-1 מקורם באפיתל של צינור האיסוף הקורטיקלי ושומרים על תכונות מובחנות רבות של קטע נפרון זה. תאים אלה מבטאים סמנים האופייניים לתאי צינור האיסוף הקורטיקלי, כולל תעלות נתרן אפיתליאליות (ENaC), אקוופורינים וחלבוני צומת הדוקים, מה שהופך אותם למודל in vitro נפוץ למחקרים על פיזיולוגיה של הכליות, הובלת יונים וקיטוב אפיתליאלי.

מבחינה תפקודית, תאי M-1 מפגינים התנגדות טרנסאפיתליאלית גבוהה ותכונות הובלת יונים וקטוריות, החיוניות לחקר ספיגת הנתרן המווסתת על ידי אלדוסטרון והובלת המים בתיווך וזופרסין. על פי האפיון הבסיסי של Stoos et al., תאי M-1 יוצרים שכבות חד-ממדיות מקוטבות על מצעים חדירים ומגיבים כראוי לגירויים הורמונליים, כגון דקסמתזון ואלדוסטרון, המווסתים את הביטוי והפעילות של חלבוני הובלה. תכונות אלה הופכות את תאי M-1 ליקרי ערך במיוחד בניתוח מנגנונים של טיפול באלקטרוליטים ואיתות תאי בתאי אפיתל הכליה.

יתר על כן, תאי M-1 אומתו במחקרים עדכניים יותר, כולל אימות גנטי באמצעות פרופיל STR עבור קווי תאים של עכברים. הדבר מדגיש את הרלוונטיות והאמינות המתמשכות שלהם במחקר הפיזיולוגיה הכלייתית העכשווית. יכולתם לשחזר התנהגויות דמויות in vivo בתנאים מבוקרים ביססה אותם כסטנדרט במחקרים על תפקוד אפיתל, נפרוטוקסיות ומודלים של מחלות כליות.

Tissue
כליה, צינור איסוף קליפת המוח
Synonyms
  • M1-CCD

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל

04Identifiers

Citation
M-1 (מספר קטלוגי Cytion 305261)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_8786

05Expression and susceptibility

Viruses
נגיף סימיאן 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 5% FBS, 5 µM דקסמתזון
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
Tg(SV40E)Bri/7 טרנסגני
Donor age
לא צוין