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Tissue
Rein, canal collecteur cortical
Synonyms
M1-CCD

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M-1

Cell line · Product number 305261

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire M-1 est un modèle épithélial bien caractérisé dérivé du rein d’une souris adulte transgénique. Plus précisément, les cellules M-1 proviennent de l’épithélium des canaux collecteurs corticaux et conservent de nombreuses caractéristiques de différenciation propres à ce segment du néphron. Ces cellules expriment des marqueurs typiques des cellules des canaux collecteurs corticaux, notamment les canaux sodiques épithéliaux (ENaC), les aquaporines et les protéines des jonctions serrées, ce qui en fait un modèle in vitro largement utilisé pour les études sur la physiologie rénale, le transport ionique et la polarité épithéliale.

Sur le plan fonctionnel, les cellules M-1 présentent une résistance transépithéliale élevée et des propriétés de transport ionique vectoriel, qui sont essentielles pour l’étude de la réabsorption du sodium régulée par l’aldostérone et du transport de l’eau médié par la vasopressine. Selon la caractérisation fondamentale réalisée par Stoos et al., les cellules M-1 forment des monocouches polarisées sur des supports perméables et présentent une réactivité appropriée aux stimuli hormonaux, tels que la dexaméthasone et l’aldostérone, qui régulent l’expression et l’activité des protéines de transport. Ces caractéristiques rendent les cellules M-1 particulièrement utiles pour analyser les mécanismes de gestion des électrolytes et de signalisation cellulaire dans les cellules épithéliales rénales.

De plus, les cellules M-1 ont été validées dans des études plus récentes, notamment par une authentification génétique utilisant le profilage STR pour les lignées cellulaires de souris. Cela souligne leur pertinence et leur fiabilité continues dans la recherche contemporaine en physiologie rénale. Leur capacité à reproduire des comportements similaires à ceux observés in vivo dans des conditions contrôlées en a fait une référence dans les études sur la fonction épithéliale, la néphrotoxicité et la modélisation des maladies rénales.

Tissue
Rein, canal collecteur cortical
Synonyms
  • M1-CCD

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Épithélial

04Identifiers

Citation
M-1 (numéro de catalogue Cytion 305261)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_8786

05Expression and susceptibility

Viruses
Virus simien 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM : F12 de Ham (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 5 % de FBS et 5 µM de dexaméthasone
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Breed / subspecies
Transgénique Tg(SV40E)Bri/7
Donor age
Non précisé