- Tissue
- 腎臟,皮質集合管
- Synonyms
- M1-CCD
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M-1
Cell line · Product number 305261
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01General information
- Description
M-1 細胞系是一種特徵明確的上皮模型,源自轉基因成年小鼠的腎臟。具體而言,M-1 細胞源自皮質集合管上皮,並保留了該腎單位段的許多分化特徵。 這些細胞表達皮質集合管細胞的典型標記物,包括上皮鈉通道(ENaC)、水通道蛋白及緊密連接蛋白,因此成為腎臟生理學、離子轉運及上皮極性研究中廣泛應用的體外模型。
在功能方面,M-1 細胞展現出高跨上皮電阻及定向離子轉運特性,這些特性對於研究醛固酮調節的鈉重吸收以及抗利尿激素介導的水轉運至關重要。 根據 Stoos 等人所進行的基礎特性分析,M-1 細胞會在滲透性載體上形成極化的單層,並對調節轉運蛋白質表達與活性的荷爾蒙刺激(例如地塞米松和醛固酮)展現適當的反應性。 這些特徵使 M-1 細胞在剖析腎臟上皮細胞中的電解質處理和細胞訊號傳導機制方面具有特別重要的價值。
此外,M-1 細胞已在近期研究中獲得驗證,包括針對小鼠細胞系進行的 STR 分析遺傳鑑定。 這凸顯了它們在當代腎臟生理學研究中的持續相關性與可靠性。其能在受控條件下重現類似體內行為的能力,已使其成為上皮功能、腎毒性及腎臟疾病建模研究中的標準。
- Tissue
- 腎臟,皮質集合管
- Synonyms
- M1-CCD
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮性
04Identifiers
- Citation
- M-1(Cytion 型號 305261)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_8786
05Expression and susceptibility
- Viruses
- 猿病毒 40 型(SV40)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12(1:1),重量比:3.1 g/L 葡萄糖,重量比:2.5 mM L-谷氨酰胺,重量比:15 mM HEPES, w: 0.5 mM 丙酮酸鈉,w: 1.2 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 5% FBS 及 5 µM 地塞米松
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Breed / subspecies
- Tg(SV40E)Bri/7 轉基因
- Donor age
- 未指定
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes