- Tecido
- Rim, ducto coletor cortical
- Sinónimos
- M1-CCD
Documentos
M-1
Cell line · Número do produto 305261
Personalização / Recomendações
- M-1Cell line€550.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A linha celular M-1 é um modelo epitelial bem caracterizado derivado do rim de um rato adulto transgénico. Especificamente, as células M-1 são originárias do epitélio do ducto coletor cortical e mantêm muitas caraterísticas diferenciadas deste segmento do néfron. Estas células expressam marcadores típicos das células do ducto coletor cortical, incluindo canais epiteliais de sódio (ENaC), aquaporinas e proteínas de junção apertada, o que as torna um modelo in vitro amplamente utilizado para estudos de fisiologia renal, transporte de iões e polaridade epitelial.
Funcionalmente, as células M-1 apresentam uma elevada resistência transepitelial e propriedades de transporte vetorial de iões, que são fundamentais para o estudo da reabsorção de sódio regulada pela aldosterona e do transporte de água mediado pela vasopressina. De acordo com a caraterização fundamental de Stoos et al., as células M-1 formam monocamadas polarizadas em suportes permeáveis e mostram uma resposta adequada a estímulos hormonais, como a dexametasona e a aldosterona, que regulam a expressão e a atividade das proteínas de transporte. Estas caraterísticas tornam as células M-1 particularmente valiosas para dissecar os mecanismos de manipulação de electrólitos e de sinalização celular em células epiteliais renais.
Além disso, as células M-1 foram validadas em estudos mais recentes, incluindo a autenticação genética utilizando perfis STR para linhas celulares de ratinhos. Isto sublinha a sua contínua relevância e fiabilidade na investigação contemporânea da fisiologia renal. A sua capacidade de recapitular comportamentos semelhantes aos in vivo em condições controladas estabeleceu-as como um padrão em estudos sobre a função epitelial, nefrotoxicidade e modelação de doenças renais.
- Tecido
- Rim, ducto coletor cortical
- Sinónimos
- M1-CCD
02Classificação
- Organismo
- Rato
- Sexo
- Não especificado
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Estatuto em matéria de OGM
- GMO-S1
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- Epitelial
04Identificadores
- Referência
- M-1 (número de catálogo Cytion 305261)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_8786
05Expressão e suscetibilidade
- Vírus
- Vírus símio 40 (SV40)
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Suplementar o meio com 5% de FBS, 5 µM de dexametasona
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Raça / subespécie
- Tg(SV40E)Bri/7 transgénico
- Idade do dador
- Não especificado
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim