Gå direkte til indholdet
Væv
Nyre, kortikal samlegang
Synonymer
M1-CCD

Dokumenter

M-1

Cell line · Varenummer 305261

€550.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

M-1-cellelinjen er en velkarakteriseret epitelmodel, der stammer fra nyrerne hos en transgen voksen mus. Specifikt stammer M-1-celler fra det kortikale samlegangsepitel og bevarer mange differentierede træk ved dette nefronsegment. Disse celler udtrykker markører, der er typiske for kortikale samlerkanalceller, herunder epitheliale natriumkanaler (ENaC), aquaporiner og tight junction-proteiner, hvilket gør dem til en meget anvendt in vitro-model til nyrefysiologi, iontransport og epithelial polaritetsstudier.

Funktionelt udviser M-1-celler høj transepithelial modstand og vektorielle iontransportegenskaber, som er afgørende for at studere aldosteronreguleret natriumreabsorption og vasopressinmedieret vandtransport. Ifølge den grundlæggende karakterisering af Stoos et al. danner M-1-celler polariserede monolag på permeable underlag og viser passende respons på hormonelle stimuli, såsom dexamethason og aldosteron, der regulerer transportproteiners udtryk og aktivitet. Disse egenskaber gør M-1-celler særligt værdifulde til dissekering af mekanismer for elektrolythåndtering og cellulær signalering i nyreepitelceller.

Desuden er M-1-celler blevet valideret i nyere undersøgelser, herunder genetisk autentificering ved hjælp af STR-profilering for musecellelinjer. Dette understreger deres fortsatte relevans og pålidelighed i moderne nyrefysiologisk forskning. Deres evne til at rekapitulere in vivo-lignende adfærd under kontrollerede forhold har etableret dem som en standard i undersøgelser af epithelfunktion, nefrotoksicitet og modellering af nyresygdomme.

Væv
Nyre, kortikal samlegang
Synonymer
  • M1-CCD

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Uspecificeret
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
M-1 (Cytion katalognummer 305261)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_8786

05Udtryk og modtagelighed

Vira
Simian virus 40 (SV40)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Supplér mediet med 5 % FBS, 5 µM dexamethason
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
Tg(SV40E)Bri/7 transgen
Donorens alder
Uspecificeret