- Tissue
- ไต, ท่อสะสมในเปลือก
- Synonyms
- M1-CCD
Documents
M-1
Cell line · Product number 305261
Customization / Recommendations
- M-1Cell line€550.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
เซลล์ไลน์ M-1 เป็นแบบจำลองเยื่อบุผิวที่มีการอธิบายลักษณะอย่างละเอียด ซึ่งได้มาจากไตของหนูโตที่ผ่านการดัดแปลงพันธุกรรมโดยเฉพาะอย่างยิ่ง เซลล์ M-1 มีต้นกำเนิดจากเยื่อบุท่อรวบรวมในคอร์เทกซ์ของไต และยังคงลักษณะเฉพาะที่แตกต่างหลายประการของส่วนนีฟรอนนี้ไว้ เซลล์เหล่านี้แสดงตัวบ่งชี้ที่เป็นลักษณะเฉพาะของเซลล์ท่อรวบรวมในคอร์เทกซ์ของไต รวมถึงช่องโซเดียมของเยื่อบุผิว (ENaC) อะควาพอร์ิน และโปรตีนที่เชื่อมติดกันแน่น ทำให้เซลล์เหล่านี้ถูกใช้เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองอย่างแพร่หลายสำหรับการศึกษาสรีรวิทยาของไต การขนส่งไอออน และการศึกษาความแตกต่างของเซลล์เยื่อบุผิว
ในเชิงหน้าที่ เซลล์ M-1 แสดงความต้านทานข้ามเยื่อบุผิวสูงและคุณสมบัติการขนส่งไอออนแบบเวกเตอร์ ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการศึกษาการดูดซึมโซเดียมที่ควบคุมโดยอัลโดสเตอโรนและการขนส่งน้ำที่ควบคุมโดยวาโซเพรสซินตามการจำแนกพื้นฐานโดย Stoos และคณะ เซลล์ M-1 จะสร้างชั้นเดียวที่มีการแบ่งขั้วบนวัสดุรองรับที่ซึมผ่านได้ และแสดงการตอบสนองที่เหมาะสมต่อสิ่งกระตุ้นทางฮอร์โมน เช่น เดกซาเมทาโซนและอัลโดสเตอโรน ซึ่งควบคุมการแสดงออกและกิจกรรมของโปรตีนขนส่ง คุณลักษณะเหล่านี้ทำให้เซลล์ M-1 มีคุณค่าอย่างยิ่งในการวิเคราะห์กลไกการจัดการอิเล็กโทรไลต์และการส่งสัญญาณในเซลล์เยื่อบุผิวไต
นอกจากนี้ เซลล์ M-1 ยังได้รับการยืนยันความถูกต้องในงานวิจัยล่าสุด รวมถึงการตรวจสอบทางพันธุกรรมโดยใช้การวิเคราะห์ STR สำหรับสายพันธุ์เซลล์หนู ซึ่งเน้นย้ำถึงความเกี่ยวข้องและความน่าเชื่อถืออย่างต่อเนื่องในการวิจัยสรีรวิทยาไตสมัยใหม่ ความสามารถในการจำลองพฤติกรรมที่คล้ายกับในร่างกายภายใต้สภาวะที่ควบคุมได้ ทำให้เซลล์เหล่านี้กลายเป็นมาตรฐานในการศึกษาหน้าที่ของเซลล์เยื่อบุผิว ความเป็นพิษต่อไต และการสร้างแบบจำลองโรคไต
- Tissue
- ไต, ท่อสะสมในเปลือก
- Synonyms
- M1-CCD
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- เยื่อบุผิว
04Identifiers
- Citation
- M-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305261)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_8786
05Expression and susceptibility
- Viruses
- ไวรัสซิมเบียน 40 (SV40)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 5%, dexamethasone 5 µM
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Breed / subspecies
- Tg(SV40E)Bri/7 ทรานส์เจเนติก
- Donor age
- ไม่ระบุ
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes