M-1

A linhagem celular M-1 é um modelo epitelial bem caracterizado, derivado do rim de um camundongo adulto transgênico. Especificamente, as células M-1 têm origem no epitélio do ducto coletor cortical e mantêm muitas características diferenciadas desse segmento do néfron. Essas células expressam marcadores típicos das células do ducto coletor cortical, incluindo canais epiteliais de sódio (ENaC), aquaporinas e proteínas de junções apertadas, o que as torna um modelo in vitro amplamente utilizado para estudos de fisiologia renal, transporte iônico e polaridade epitelial.

Funcionalmente, as células M-1 apresentam alta resistência transepitelial e propriedades de transporte vetorial de íons, que são essenciais para o estudo da reabsorção de sódio regulada pela aldosterona e do transporte de água mediado pela vasopressina. De acordo com a caracterização fundamental realizada por Stoos et al., as células M-1 formam monocamadas polarizadas em suportes permeáveis e apresentam resposta adequada a estímulos hormonais, como a dexametasona e a aldosterona, que regulam a expressão e a atividade das proteínas de transporte. Essas características tornam as células M-1 particularmente valiosas na análise dos mecanismos de manejo de eletrólitos e sinalização celular nas células epiteliais renais.

Além disso, as células M-1 foram validadas em estudos mais recentes, incluindo autenticação genética por meio de perfilagem de STR para linhagens celulares de camundongos. Isso ressalta sua contínua relevância e confiabilidade na pesquisa contemporânea em fisiologia renal. Sua capacidade de reproduzir comportamentos semelhantes aos in vivo sob condições controladas as consolidou como padrão em estudos sobre função epitelial, nefrotoxicidade e modelagem de doenças renais.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.