M-1

La linea cellulare M-1 è un modello epiteliale ben caratterizzato derivato dal rene di un topo adulto transgenico. In particolare, le cellule M-1 originano dall'epitelio del dotto collettore corticale e conservano molte caratteristiche differenziate di questo segmento di nefrone. Queste cellule esprimono marcatori tipici delle cellule del dotto collettore corticale, tra cui i canali epiteliali del sodio (ENaC), le acquaporine e le proteine della giunzione stretta, che le rendono un modello in vitro ampiamente utilizzato per studi di fisiologia renale, trasporto ionico e polarità epiteliale.

Dal punto di vista funzionale, le cellule M-1 presentano un'elevata resistenza transepiteliale e proprietà di trasporto ionico vettoriale, fondamentali per lo studio del riassorbimento del sodio regolato dall'aldosterone e del trasporto di acqua mediato dalla vasopressina. Secondo la caratterizzazione fondamentale di Stoos et al., le cellule M-1 formano monostrati polarizzati su supporti permeabili e mostrano un'adeguata reattività agli stimoli ormonali, come il desametasone e l'aldosterone, che regolano l'espressione e l'attività delle proteine di trasporto. Queste caratteristiche rendono le cellule M-1 particolarmente preziose per analizzare i meccanismi di gestione degli elettroliti e di segnalazione cellulare nelle cellule epiteliali renali.

Inoltre, le cellule M-1 sono state convalidate in studi più recenti, tra cui l'autenticazione genetica utilizzando il profilo STR per le linee cellulari di topo. Ciò sottolinea la loro continua rilevanza e affidabilità nella ricerca contemporanea sulla fisiologia renale. La loro capacità di ricapitolare comportamenti simili a quelli in vivo in condizioni controllate le ha rese uno standard negli studi sulla funzione epiteliale, sulla nefrotossicità e sulla modellazione delle malattie renali.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia