Gå til innholdet
Vev
Nyre, kortikal samlekanal
Synonymer
M1-CCD

Dokumenter

M-1

Cell line · Produktnummer 305261

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

M-1-cellelinjen er en velkarakterisert epitelmodell avledet fra nyrene til en transgen voksen mus. M-1-cellene stammer fra epitelet i de kortikale samlegangene og har mange av de differensierte egenskapene til dette nefronsegmentet. Disse cellene uttrykker markører som er typiske for kortikale samlegangsceller, inkludert epiteliale natriumkanaler (ENaC), akvaporiner og tight junction-proteiner, noe som gjør dem til en mye brukt in vitro-modell for studier av nyrefysiologi, ionetransport og epitelial polaritet.

Funksjonelt sett har M-1-celler høy transepitelial motstand og vektorielle ionetransportegenskaper, noe som er avgjørende for å studere aldosteronregulert natriumreabsorpsjon og vasopressinmediert vanntransport. Ifølge den grunnleggende karakteriseringen til Stoos og medarbeidere danner M-1-celler polariserte monolag på permeable underlag, og de reagerer på hormonelle stimuli, som deksametason og aldosteron, som regulerer transportproteinuttrykk og -aktivitet. Disse egenskapene gjør M-1-celler spesielt verdifulle når det gjelder å dissekere mekanismer for elektrolytthåndtering og cellulær signalering i nyrenes epitelceller.

M-1-celler har dessuten blitt validert i nyere studier, inkludert genetisk autentisering ved hjelp av STR-profilering for musecellelinjer. Dette understreker deres fortsatte relevans og pålitelighet i moderne nyrefysiologisk forskning. Deres evne til å rekapitulere in vivo-lignende atferd under kontrollerte forhold har etablert dem som en standard i studier av epitelfunksjon, nefrotoksisitet og modellering av nyresykdommer.

Vev
Nyre, kortikal samlekanal
Synonymer
  • M1-CCD

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Uspesifisert
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
M-1 (Cytion-katalognummer 305261)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_8786

05Uttrykk og mottakelighet

Virus
Simian virus 40 (SV40)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 5 % FBS, 5 µM deksametason
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
Tg(SV40E)Bri/7 transgen
Donorens alder
Uspesifisert