Перейти до вмісту
Тканина
Нирка, кіркова збірна протока
Синоніми
M1-CCD

Документи

М-1

Cell line · Номер товару 305261

€550.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія М-1 є добре охарактеризованою епітеліальною моделлю, отриманою з нирки трансгенної дорослої миші. Зокрема, клітини М-1 походять з епітелію кіркової збірної протоки і зберігають багато диференційованих особливостей цього сегмента нефрону. Ці клітини експресують маркери, характерні для клітин кіркової збірної протоки, включаючи епітеліальні натрієві канали (ENaC), аквапорини та білки щільних з'єднань, що робить їх широко використовуваною моделлю in vitro для вивчення фізіології нирок, транспорту іонів та полярності епітелію.

Функціонально клітини М-1 демонструють високу трансепітеліальну резистентність та властивості векторного транспорту іонів, що є критично важливими для вивчення альдостерон-регульованої реабсорбції натрію та вазопресин-опосередкованого транспорту води. Згідно з фундаментальною характеристикою Стооса та ін., клітини М-1 утворюють поляризовані моношари на проникних підкладках і демонструють відповідну реакцію на гормональні стимули, такі як дексаметазон та альдостерон, які регулюють експресію та активність транспортних білків. Ці особливості роблять клітини М-1 особливо цінними для вивчення механізмів транспортування електролітів і клітинної сигналізації в епітеліальних клітинах нирок.

Крім того, клітини М-1 були підтверджені в останніх дослідженнях, включаючи генетичну автентифікацію за допомогою STR-профілювання клітинних ліній мишей. Це підкреслює їх постійну актуальність та надійність у сучасних дослідженнях ниркової фізіології. Їх здатність відтворювати поведінку, подібну до поведінки in vivo, в контрольованих умовах зробила їх стандартом у дослідженнях епітеліальної функції, нефротоксичності та моделюванні ниркових захворювань.

Тканина
Нирка, кіркова збірна протока
Синоніми
  • M1-CCD

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Не вказано
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальний

04Ідентифікатори

Посилання
M-1 (номер за каталогом Цитіон 305261)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_8786

05Експресія та сприйнятливість

Віруси
Вірус сибірки 40 (SV40)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ Піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3 (цит. номер 820400a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 5% FBS, 5 мкМ дексаметазону
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
Tg(SV40E)Bri/7 трансгенний
Вік донора
Не визначено