Prejsť na obsah
Tkanivo
Obličky, kortikálny zberný kanálik
Synonymá
M1-CCD

Dokumenty

M-1

Cell line · Číslo výrobku 305261

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia M-1 je dobre charakterizovaný epitelový model odvodený z obličky transgénnej dospelej myši. Bunky M-1 pochádzajú konkrétne z epitelu kortikálneho zberného kanálika a zachovávajú si mnohé diferencované znaky tohto segmentu nefrónu. Tieto bunky exprimujú markery typické pre bunky kortikálnych zberných kanálikov vrátane epitelových sodíkových kanálov (ENaC), akvaporínov a proteínov tesného spojenia, vďaka čomu sú široko používaným modelom in vitro pre fyziológiu obličiek, transport iónov a štúdie epitelovej polarity.

Z funkčného hľadiska vykazujú bunky M-1 vysokú transepiteliálnu rezistenciu a vektorové vlastnosti transportu iónov, ktoré sú rozhodujúce pre štúdium aldosterónom regulovanej reabsorpcie sodíka a vazopresínom sprostredkovaného transportu vody. Podľa základnej charakteristiky Stoosa a kol. tvoria bunky M-1 polarizované monovrstvy na priepustných nosičoch a vykazujú primeranú reakciu na hormonálne podnety, ako je dexametazón a aldosterón, ktoré regulujú expresiu a aktivitu transportných proteínov. Vďaka týmto vlastnostiam sú bunky M-1 obzvlášť cenné pri pitve mechanizmov manipulácie s elektrolytmi a bunkovej signalizácie v epitelových bunkách obličiek.

Bunky M-1 boli navyše overené v novších štúdiách vrátane genetickej autentifikácie pomocou profilovania STR pre myšie bunkové línie. To podčiarkuje ich trvalý význam a spoľahlivosť v súčasnom výskume fyziológie obličiek. Ich schopnosť rekapitulovať správanie podobné in vivo v kontrolovaných podmienkach ich etablovala ako štandard v štúdiách epiteliálnej funkcie, nefrotoxicity a modelovania obličkových ochorení.

Tkanivo
Obličky, kortikálny zberný kanálik
Synonymá
  • M1-CCD

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové

04Identifikátory

Citácia
M-1 (katalógové číslo Cytion 305261)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_8786

05Prejav a náchylnosť

Vírusy
Simian vírus 40 (SV40)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 5 % FBS, 5 µM dexametazónu
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
Tg(SV40E)Bri/7 transgénne
Vek darcu
Nešpecifikované