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Pañuelo de papel
Riñón, conducto colector cortical
Sinónimos
M1-CCD

Documentos

M-1

Cell line · Número de producto 305261

€550.00sin impuestos ni gastos de envío
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Lote
Recomendado (lote más fresco)
  • CoA
1

01Información general

Descripción

La línea celular M-1 es un modelo epitelial bien caracterizado derivado del riñón de un ratón adulto transgénico. En concreto, las células M-1 se originan a partir del epitelio del conducto colector cortical y conservan muchas características diferenciadas de este segmento de nefrona. Estas células expresan marcadores típicos de las células del conducto colector cortical, incluyendo canales epiteliales de sodio (ENaC), acuaporinas y proteínas de unión estrecha, lo que las convierte en un modelo in vitro ampliamente utilizado para estudios de fisiología renal, transporte iónico y polaridad epitelial.

Desde el punto de vista funcional, las células M-1 presentan una elevada resistencia transepitelial y propiedades de transporte vectorial de iones, que son fundamentales para estudiar la reabsorción de sodio regulada por aldosterona y el transporte de agua mediado por vasopresina. Según la caracterización fundacional de Stoos et al., las células M-1 forman monocapas polarizadas sobre soportes permeables y muestran una capacidad de respuesta adecuada a estímulos hormonales, como la dexametasona y la aldosterona, que regulan la expresión y la actividad de las proteínas transportadoras. Estas características hacen que las células M-1 sean especialmente valiosas para diseccionar los mecanismos de manipulación de electrolitos y señalización celular en células epiteliales renales.

Además, las células M-1 han sido validadas en estudios más recientes, incluida la autentificación genética mediante perfiles de STR para líneas celulares de ratón. Esto subraya su continua relevancia y fiabilidad en la investigación fisiológica renal contemporánea. Su capacidad para recapitular comportamientos similares a los in vivo en condiciones controladas las ha establecido como un estándar en los estudios sobre la función epitelial, la nefrotoxicidad y el modelado de enfermedades renales.

Pañuelo de papel
Riñón, conducto colector cortical
Sinónimos
  • M1-CCD

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Sin especificar
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial

04Identificadores

Referencia
M-1 (número de catálogo 305261 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_8786

05Expresión y susceptibilidad

Virus
Virus simio 40 (SV40)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con 5% FBS, 5 µM de dexametasona
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
Tg(SV40E)Bri/7 transgénico
Edad del donante
Sin especificar