- الأنسجة
- الكلى، قناة التجميع القشرية القشرية
- المرادفات
- M1-CCD
المستندات
M-1
Cell line · رقم المنتج 305261
التخصيص / التوصيات
- M-1Cell line€550.00
موصى بها (أحدث دفعة)
01معلومات عامة
- الوصف
خط الخلايا M-1 هو نموذج طلائي مميز مستمد من كلية فأر بالغ معدّل وراثياً. على وجه التحديد، تنشأ خلايا M-1 من ظهارة القناة التجميعية القشرية وتحتفظ بالعديد من السمات المتمايزة لهذا الجزء من النفرون. تُعبّر هذه الخلايا عن علامات نموذجية لخلايا القناة التجميعية القشرية، بما في ذلك قنوات الصوديوم الظهارية (ENaC)، والأكوابورين، وبروتينات الوصلات الضيقة، مما يجعلها نموذجاً واسع الاستخدام في المختبر لفسيولوجيا الكلى، ونقل الأيونات، ودراسات القطبية الظهارية.
من الناحية الوظيفية، تُظهر خلايا M-1 مقاومة عالية عبر الظهارة وخصائص نقل الأيونات الناقلة، والتي تعتبر حاسمة لدراسة إعادة امتصاص الصوديوم المنظم بالألدوستيرون ونقل الماء بوساطة الفازوبريسين. ووفقًا للتوصيف التأسيسي الذي قام به ستوس وآخرون، تشكل خلايا M-1 طبقات أحادية مستقطبة على دعامات قابلة للنفاذ وتُظهر استجابة مناسبة للمنبهات الهرمونية، مثل ديكساميثازون والألدوستيرون، التي تنظم تعبير بروتين النقل ونشاطه. هذه الميزات تجعل خلايا M-1 ذات قيمة خاصة في تشريح آليات التعامل مع الإلكتروليت والإشارات الخلوية في الخلايا الظهارية الكلوية.
وعلاوة على ذلك، تم التحقق من صحة خلايا M-1 في دراسات أكثر حداثة، بما في ذلك المصادقة الجينية باستخدام التنميط الوراثي لسلالات خلايا الفئران. وهذا يؤكد استمرار أهميتها وموثوقيتها في أبحاث فسيولوجيا الكلى المعاصرة. وقد أثبتت قدرتها على تلخيص السلوكيات الشبيهة بالسلوكيات الحية في ظل ظروف خاضعة للرقابة أنها معيار في الدراسات حول الوظيفة الظهارية والسمية الكلوية ونمذجة أمراض الكلى.
- الأنسجة
- الكلى، قناة التجميع القشرية القشرية
- المرادفات
- M1-CCD
02التصنيف
- كائن حي
- الماوس
- الجنس
- غير محدد
- خصائص النمو
- الملتزم
- حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- GMO-S1
- تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- GMO-S1: This murine collecting duct cell line (M-1) contains the early region of SV40 from a transgenic mouse line (Tg(SV40E)Bri7), supporting stable immortalization. The construct is endogenously integrated in the transgenic background. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- المورفولوجيا
- الظهارة
04المعرّفات
- المرجع
- M-1 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305261)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 10090
- سيلوصور
- CVCL_8786
05التعبير والقابلية للإصابة
- الفيروسات
- فيروس سيميان 40 (SV40)
06التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- يُضاف إلى الوسط 5٪ FBS، 5 ميكرومتر ديكساميثازون
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
08المانح
- السلالة / النوع الفرعي
- المعدلة وراثيًا Tg(SV40E)Bri/7
- عمر المتبرع
- غير محدد
09الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم