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Tissu
Rein
Maladie
Épithélium rénal normal
Synonymes
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Documents

MDCK-II

Cell line · Référence du produit 305233

€750.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Les cellules Madin-Darby Canine Kidney type II (MDCK-II) sont une lignée de cellules épithéliales dérivées du rein d'un cocker femelle adulte. Ces cellules sont largement utilisées dans la recherche biomédicale en raison de leur capacité unique à former des jonctions serrées et des monocouches polarisées, qui sont des caractéristiques des tissus épithéliaux. Les cellules MDCK-II présentent de solides propriétés de croissance et de différenciation, ce qui en fait un excellent modèle pour l'étude de la biologie des cellules épithéliales, notamment la polarité cellulaire, les processus de transport et la fonction de barrière

La lignée cellulaire MDCK-II est particulièrement précieuse pour l'étude des mécanismes d'interaction entre le virus et l'hôte, notamment pour la recherche sur le virus de la grippe. La capacité des cellules à former des monocouches polarisées les rend idéales pour l'étude de la libération et de la propagation directionnelles des virus. En outre, les cellules MDCK-II sont fréquemment utilisées dans les études sur le transport et la toxicité des médicaments, car leurs jonctions serrées bien définies constituent un modèle fiable pour évaluer la perméabilité et la fonction de barrière des cellules épithéliales. Leur réactivité à divers facteurs de croissance et hormones renforce encore leur utilité dans diverses applications de recherche

Les chercheurs utilisent également les cellules MDCK-II pour explorer la physiologie et la pathophysiologie rénales, étant donné qu'elles proviennent du tissu rénal. Cette lignée cellulaire permet de mieux comprendre le fonctionnement des cellules épithéliales rénales, notamment le transport des ions, la régulation des fluides et les réponses cellulaires aux lésions. Dans l'ensemble, les cellules MDCK-II constituent un outil polyvalent et essentiel pour l'étude de la biologie des cellules épithéliales et des domaines biomédicaux connexes

Tissu
Rein
Maladie
Épithélium rénal normal
Applications
Virologie ; études sur le transport épithélial ; recherche sur les jonctions serrées ; tests de perméabilité aux médicaments ; biologie cellulaire
Synonymes
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Classification

Organisme
Chien
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
Sans OGM
Informations détaillées sur le statut OGM
No genetic modification; wildtype cell line
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Type de cellule
Épithéliale
Temps de doublement
environ 16 à 20 heures

04Identifiants

Référence
MDCK-II (numéro de catalogue 305233 de Cytion)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Manipulation et culture

Milieu de culture
EMEM (MEM Eagle), w : 2 mM L-Glutamine, w : 2.2 g/L NaHCO3, w : EBSS (numéro d'article Cytion 820100a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Rapport de fractionnement
1 à 5
Densité de semis
2 à 5 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Race / sous-espèce
Épagneul cocker
Âge du donneur
Adulte