Přejít na obsah
Tkáň
Ledviny
Nemoc
Normální epitel ledvin
Synonyma
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Dokumenty

MDCK-II

Cell line · Číslo výrobku 305233

€750.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky Madin-Darbyho psí ledviny typu II (MDCK-II) jsou epiteliální buněčnou linií odvozenou z ledvin dospělých fen kokršpaněla. Tyto buňky jsou široce využívány v biomedicínském výzkumu díky své jedinečné schopnosti vytvářet těsné spoje a polarizované monovrstvy, což jsou charakteristické znaky epiteliálních tkání. Buňky MDCK-II vykazují robustní růstové a diferenciační vlastnosti, což z nich činí vynikající model pro studium biologie epiteliálních buněk, včetně buněčné polarity, transportních procesů a bariérové funkce

Buněčná linie MDCK-II je zvláště cenná pro zkoumání mechanismů interakcí mezi virem a hostitelem, zejména pro výzkum viru chřipky. Schopnost buněk vytvářet polarizované monovrstvy je ideální pro studium směrového uvolňování a šíření virů. Kromě toho se buňky MDCK-II často používají při studiích transportu a toxicity léčiv, protože jejich dobře definované těsné spoje poskytují spolehlivý model pro hodnocení propustnosti a bariérové funkce epiteliálních buněk. Jejich reaktivita na různé růstové faktory a hormony dále zvyšuje jejich užitečnost v různých výzkumných aplikacích

Vzhledem k tomu, že buňky MDCK-II pocházejí z ledvinové tkáně, používají je výzkumníci také ke zkoumání fyziologie a patofyziologie ledvin. Tato buněčná linie umožňuje nahlédnout do funkce ledvinových epiteliálních buněk, včetně transportu iontů, regulace tekutin a buněčných reakcí na poranění. Celkově lze říci, že buňky MDCK-II jsou všestranným a nezbytným nástrojem při studiu biologie epiteliálních buněk a souvisejících biomedicínských oborů

Tkáň
Ledviny
Nemoc
Normální epitel ledvin
Aplikace
Virologie; studie epiteliálního transportu; výzkum těsných spojů; testy propustnosti léčiv; buněčná biologie
Synonyma
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Klasifikace

Organismus
Pes
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o statusu GMO
No genetic modification; wildtype cell line
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epitelové
Doba zdvojnásobení
cca 16–20 hodin

04Identifikátory

Citace
MDCK-II (katalogové číslo Cytion 305233)
Daňové identifikační číslo NCBI
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 5
Hustota výsevu
2 až 5 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Plemeno / poddruh
Kokršpaněl
Věk dárce
Dospělí